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上海吉至生化科技有限公司
主營產品： 潮霉素b,DTT二硫蘇糖醇,Albumin BovineⅤ 牛血清白蛋白Ⅴ,Zeocin 博萊霉素 1.25ml -20℃ （125mg）,IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷 進口 100g |
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2023-7-5 閱讀(232)
復蘇：
1. 把凍存管從液氮中取出來，立即投入37℃水浴鍋中，輕微搖動。液體都融化后（大概1-1.5分鐘），拿出來噴點酒精放到超凈工作臺里。
2. 把上述細胞懸液吸到裝10ml培養基的15ml的離心管中（用培養基把凍存管洗一遍，把粘在壁上的細胞都洗下來），1000轉離心5分鐘。
3. 把上清液倒掉，加1ml培養基把細胞懸浮起來。吸到裝有10ml培養基的10cm培養皿中前后左右輕輕搖動，使培養皿中的細胞均勻分布。
4. 標好細胞種類和日期、培養人名字等，放到CO2培養箱中培養，細胞貼壁后換培養基。
5. 3天換一次培養基。
傳代：
1. 培養皿中的細胞覆蓋率達到80%-90%時要傳代。
2. 把原有培養基吸掉。
3. 加適當的胰蛋白酶（能覆蓋細胞就行），消化1-2分鐘。
4. 細胞都變圓后加如入等體積的含血清的培養基終止消化。
5. 用移液槍吹打細胞，把細胞都懸浮起來。
6. 把細胞吸到15ml的離心管中，1000轉離心5分鐘。
7. 倒掉上清液，加1-2ml培養基，把細胞都吹起來。
8. 根據細胞種類把細胞傳到幾個培養皿中。一般，癌細胞分5個，正常細胞傳3個。繼續培養。
