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技術文章

實驗室里的寶藏:AF594 Ethyl NHS Ester大揭秘!

閱讀:33          發布時間:2025-7-9

高熒光亮度:AF594 是一種水溶性的紅熒光染料,熒光亮度高,光穩定性好。

pH穩定性:在pH 4-10范圍內熒光不受影響。

高標記效率:通過NHS酯基團與生物分子中的伯胺(-NH2)反應,形成穩定的酰胺鍵。

高水溶性:磺化結構使其具有良好的水溶性,減少蛋白質聚集。 

基礎知識概述:  

英文名:AF594 Ethyl NHS Ester 

規格標準:1mg、5mg、10mg 

試劑廠家:陜西新研博美生物科技有限公司

相關應用:

1.蛋白質標記:

可用于標記抗體、蛋白質、肽段等生物分子。

2.核酸標記:

可用于標記胺修飾的寡核苷酸。

3.多色成像:

適用于多色熒光顯微鏡、流式細胞術和超分辨成像技術(如dSTORM、SIM、STED等)。

使用方法:

1.標記蛋白質:

準備蛋白質儲備液(溶液A):

將100 μL反應緩沖液(如pH 8.5-9.0的1 M碳酸氫鈉溶液)與900 μL目標蛋白溶液(濃度>2 mg/mL)混合。

蛋白質溶液的pH值應為8.5±0.5。

準備染料儲備液(溶液B):

將無水DMSO加入AF594 NHS酯中,制備10 mM儲備溶液。

染料儲備溶液應在制備后立即使用,避免長期保存。

進行偶聯反應:

使用10:1的摩爾比(染料/蛋白質)作為起始點,將5 μL染料儲備液加入到95 μL蛋白質溶液中。

在室溫下孵育30-60分鐘。

純化偶聯物:

使用Sephadex G-25柱純化染料-蛋白質偶聯物。

2.標記寡核苷酸:

按照類似步驟進行標記,調整反應條件以適應寡核苷酸。

包裝:

638815335641964003763.jpg

質量控制:95%+

存儲條件:-20°C,避光,避濕

用途:僅供科研實驗使用,不用于診治

注意事項:取用一定要干燥,避免頻繁的溶解和凍干

取用:現配現用,將包裝從冰箱中取出,置于干燥器中緩慢升至室溫,打開瓶蓋,取用。取用后充入惰性氣體,封口膜封口,擰緊瓶蓋裝入自封袋,及時放入冰箱。


相關試劑:

DHPDS disodium salt

5-FAM maleimide

Methyl Orange

Cy7 tyramide

Sulfo-Cyanine7 NHS ester TEA

1,6-Diphenylhexa-1,3,5-triene

Sulfo-Cy5-Mal

Alexa fluor 488 azide ditriethylamine

7-Dimethylaminocoumarin-4-acetic acid

Cy5-DSPE chloride

Calcein Blue

Bromocresol green

BODIPY TR Ceramide

Vari Fluor 680-Streptavidin

Thiazole orange dimer YOYO 1

Sunset Yellow FCF 




供應商:陜西新研博美生物科技有限公司

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