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單細胞分離用于細胞鋪板的原理
閱讀：1195 發布時間：2019-7-25
單細胞分離用于細胞鋪板的原理
單細胞分離儀為細胞鋪板提供了全新解決方案。該設備采用新的微流體技術能夠實現快速，，準確的細胞鋪板工作并且分離過程輕柔，不會影響細胞的后續生長，能廣泛應用于單抗開發中的CLD環節，以及單細胞測序等。
單細胞分離用于細胞鋪板的原理如下：
將細胞通過一次性的芯片上端加樣孔，注入到芯片腔體中。單細胞流在微流控通道中流過激光檢測區域，機器能對細胞進行識別，去除掉細胞碎片，死細胞以及狀態較差的細胞，使得落到孔板中的細胞都具有很好的活性。高速電子閥門能夠捕獲每一個活性細胞，終形成1ul體積的液滴，輕柔地落進孔板中。整個過程對細胞的損傷可以忽略不計，所以分選得到的細胞絕大多數的細胞都能再次分裂生長。
單細胞鋪板整個過程非常快速，一般一塊9孔板分選需要1min左右，單個細胞一個孔的比例在85%~90%，一般細胞復蘇的比例在40%~65%。傳統的細胞鋪板一般采用手動的有限稀釋法來進行，這種方法在需要的操作簡單，只需要普通的排槍就能實現，但是效果卻很不理想。主要體現在：一致性差，有效孔比例低下，耗費時間等。
近年來，單抗藥物的開發領域又被推上了一個新的高度，越來越多的公司都紛紛投入到這個熱潮當中，隨之而來的相關法規的要求也是越來越嚴格。在眾多的要求當中，對藥物來源的單克隆源性的要求嚴格，這就要求生產和研發的企業在細胞株開發階段做到嚴格的單克隆驗證。目前市面上已經有幾款孔板掃描設備能夠得到認可，他們的數據可以用來作為單克隆源性的證明。
在這里我們要討論的是在驗證前的分離階段，如何快速、準確、的獲得單細胞，除了上面提到的有限稀釋法之外，流式細胞分選儀也可以用來作為單細胞鋪板工具之一，當然流式除了操作復雜，需要專人維護之外，分選得到的細胞常常復蘇比例比較低。在流式分選中，細胞的損傷比較大。