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使高效液相色譜-熒光檢測法對牛奶中阿維菌素類藥物進行多殘留測定
閱讀：856 發布時間：2021-12-28前言：獸藥在治療或防止動物疾病、促進動物生長、提高飼料效果等方面起著十分重要的作用， 被廣泛地用于畜牧業中。然而，由于養殖人員對科學知識的缺乏以及一味地追求經濟利 益，致使濫用獸藥現象在當前畜牧業中普遍存在。濫用獸藥極易造成肉、蛋、奶等動 物源食品中有害物質的殘留，這些藥物殘留給人的健康帶來潛在的危害，包括過敏反應， 直接中毒效應，以及對抗生素產生抗藥性等。 阿維菌素 (Avermectin)、伊維菌素 (Ivermectin)、埃普利諾菌素 (Eprinomectin) 和多拉 菌素 (Doramectin) 是一類具有殺蟲、殺螨、殺線蟲活性的十六元大環內酯化合物，是 一類被廣泛使用的農用或獸用殺蟲、殺螨劑。本文所述方法參照食品安全國家標準 GB 29696-2013，建立了牛奶中這四種阿維菌素類藥物多殘留分析的高效液相色譜法。 樣品前處理過程 稱取試料 (5+0.05) g 于 50 mL 離心管中，加乙腈 8 mL，渦旋混合 1 min，超聲 1min， 4500 r/ min 離心 10 min，取上清液于另一 50 mL 離心管中。殘渣中加乙腈 8 mL，重復提 取一次，合并兩次上清液，加水 20 mL、三乙胺 50 µL，混勻，待固相萃取凈化，固相萃 取操作流程見下圖 1。
本文所述固相萃取結合高效液相色譜-熒光檢測法可實現對奶產品 中阿維菌素、伊維菌素、埃普利諾菌素和多拉菌素的基線分離和 檢測，方法檢出限為 1 µg/kg，定量限為 2 µg/kg。對比阿維菌 素類藥物標準樣品與牛奶空白基質的色譜疊加圖（圖 2）可以看 出，在空白基質色譜圖中阿維菌素類藥物的出峰位置處無雜峰干 擾，表明本文所用 Agilent Bond Elut C18 固相萃取小柱的凈化效 果優異，可有效去除大部分干擾雜質。
如圖 3 所示，在線性范圍 5 - 1000 ng/mL 內埃普利諾菌素、阿 維菌素、多拉菌素和伊維菌素的線性相關性良好。在添加水平 2 - 40 µg/kg 下，牛奶中各阿維菌素類藥物的加標回收率為 90.43% - 102.79%，RSD ≤ 8% (n=3)，如表 2 所示。牛奶中各阿維菌素類 藥物添加水平 10 µg/kg 時，連續進樣 6 次，所得色譜疊加圖如 圖 4 所示。其中埃普利諾菌素、阿維菌素、多拉菌素和伊維菌素 的峰面積 RSD 值分別為 0.20%、0.17%、0.29% 和 0.82%，結果 表現出*的重復性。
綜上所述，本文所述方法利用 Agilent Bond Elut C18 固相萃取小 柱對樣品進行凈化，并利用安捷倫的 Poroshell 120 EC-C18 快速柱對目標物進行快速分析，方法檢出限、定量限、準確度和 精密度均滿足 GB 29696-2013 的分析要求。