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國際參考。準備

第一屆 WHO HIV-1 CRF 國際參考制劑

NIBSC 13/214

建議用下列方法恢復培養冷凍干燥保藏的菌種。
1、安瓶管開封
用浸過70％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管。
用火焰將安瓿管頂端加熱。
滴無菌水至加熱的安瓿管頂端使玻璃開裂。
用挫刀或鑷子敲下已開裂的安瓿管的頂端。

2、菌株恢復培養
用無菌吸管，吸取0.3-0.5ml適宜的液體培養基,滴人安瓿管內,輕輕振蕩,使凍于菌體溶解呈懸浮狀
取0.1-0.2ml菌體懸浮液，移植于適宜的瓊脂斜面/平板培養基上，剩余的菌液，注入適宜的液體培養基內，然后在建議的溫度下培養。

3、注意事項
菌種活化前，請將安瓿管保存在6一10℃的環境下。
厭氧菌的培養，如無特別說明，自開封至接種完成，均需以無氧氣體充填，以保持厭氧狀態。
某些菌種經過冷凍干燥保存后,延遲期較長,需連續兩次繼代培養才能正常生長,此時請將步驟二重復一次。