目前關于農藥殘留量的檢測方法主要有如下幾種:色譜法、光譜法、酶抑制法、免疫分析法和生物傳感器檢測法等。
1、色譜法:色譜法也叫色層法或層析法,它是利用物質各組分在兩相間分配系數的不同,實現各組分分離的目的,并將待測濃度轉化為電信號記錄下來的方法。目前色譜法主要有氣相色譜法、高效液相色譜法、薄層色譜法、超臨界流體色譜法。
2、光譜法:光譜法是根據農藥中的某些官能團或水解、還原產物與特殊的顯色劑在特定的環境下發生氧化、磺酸化、脂化、絡合等化學反應,產生特定波長的顏色反應來進行定性或定量測定,也可以根據含氫基團在近紅外光譜區的吸收來進行測定。
3、酶抑制法:有機磷、氨基甲酸酯類農藥進入機體以后,與膽堿酯酶結合,形成了不易水解的磷酰化膽堿酯酶,喪失了水解乙酰膽堿的活力,如果大多數膽堿酯酶都轉變為相當穩定難以水解的磷酰化膽堿酯酶,乙酰膽堿就在體內大量蓄積,產生遲發性神經毒性使中樞神經、交感神經、運動神經和一些腺體首先興奮而活動增強,引起運動失調等,后轉入抑制和衰竭、癱瘓,甚至中毒死亡。有機磷、氨基甲酸酯類農藥可以抑制乙酰膽堿酯酶的活性,使其分解乙酰膽堿的速度變慢或停止。酶抑制法的原理是利用這一反應特性,用濾紙片或電極作為載體,將乙酰膽堿酯酶吸附在上面,加入顯色劑,如果酶的活性沒有被抑制,則生成的產物可以使顯色劑顯色,如果被測樣品中含有農藥殘留,則酶活性被抑制不能生成水解產物,顯色劑不顯色,根據顏色的變化或測定酶與某種特定化合物反應的物理化學信號的變化,可判斷是否存在有機磷及氨基甲酸酯類農藥。酶抑制法大的優點是前處理簡單、檢測時間短、不需昂貴的儀器、易于掌握推廣,特別適合現場檢測以及大批樣品的篩選。但是酶抑制法測定樣品和農藥種類有限,目前只適用于蔬菜、水果中有機磷和氨基甲酸酯類農藥的殘留檢測,并且該方法使用的酶、底物、顯色劑有一定的特異性,需控制的條件比較多,易出現假陽性或假陰性現象另外其靈敏度、重復性、回收率還有待提高。
4、酶聯免疫法:農藥殘留免疫分析方法是以抗原與抗體的特異性結合為基礎,把抗體作為生物化學檢測器對化合物、酶或蛋白質等物質進行定性和定量分析的一門技術。按標記抗原或抗體標記物的不同可區分為放射免疫分析(RIA)法、酶免疫分析(EIA)法、熒光免疫分析(FIA)法等。由于保存期長、高敏感性、結果準確且可進行光譜分析等優點,使酶免疫分析法成為迄今為止農藥殘留免疫檢測中應用廣泛的一種免疫分析方法。
農藥殘留檢測試劑盒原理說明:
在一定條件下,有機磷和氨基甲酸酯類農藥對膽堿酯酶正常功能有抑制作用,其抑制率與農藥的濃度呈正相關。正常條件下,膽堿酯酶(ChE)催化神經傳導代謝產物類似物(碘化硫代乙酰膽堿ATCI或碘化硫代丁酰膽堿BTCI)水解,其水解產物與顯色劑(二硫代二硝基苯甲酸DTNB)發生反應,產生黃色物質,用分光光度計或農殘測試儀在412nm處測定吸光度的變化值(△A),計算出抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑量有機磷或氨基甲酸酯類農藥殘留的存在。
農藥殘留檢測試劑盒試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關,我司嚴格按照進行,已獲得國家承認的“三證",每一個產品都有對應的批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產品,不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應微孔內的溫度較快地達到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。