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植物血球凝集素P

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更新時間:2024-11-19 15:56:55瀏覽次數:335

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產品簡介

供貨周期 現貨 應用領域 環保,化工,生物產業,綜合
植物血球凝集素P
別名 : PHA-P PHA 植物血球凝集素(菜豆) 英文名稱 : Phytohemagglutinin PHA-P 儲存條件 : 2-8°C 單位 : 瓶

詳細介紹

植物血球凝集素P

植物血球凝集素P

慢病毒感染快速指南

1. 將目的細胞按 30%匯合度接種到 24 孔板,約 3-5×104細胞數/孔,不同細胞因為細胞大小不同細胞數量會不同,快速指南以細胞數量為 5×104為例,加入 500uL wan全培養基進行細胞培養。

2. 接種后 12-20h 感染陰性對照慢病毒(接種細胞至病毒感染細胞時間不宜太長,否則細胞增殖影響細胞密度不利用后期抗性篩選)。

3.加病毒量計算方法:(細胞數×MOI /病毒滴度)×103=病毒量(uL),加病毒量見下表。同時加入 Polybrene,每孔加 0.25uL,濃度為 10mg/mL Polybrene,細胞培養液中終濃度為5ug/mL

4.感染 16-20h 后更換培養基,棄去培養基,每孔加入 500uL 新鮮的培養基。

5.感染后 48-96h 顯微鏡觀察熒光。(注:如果 48h-96h 期間細胞匯合度達到 100%,請及時傳代培養)。

6.建議將 48 孔板細胞進行傳代,傳代 12 孔板,后繼續觀察熒光,根據細胞狀態和熒光細胞比例綜合判斷細胞感染最佳 MOI 值。一般選擇細胞生長良好,感染效率 80%左右的感染條件作為最佳感染條件。(注:100%熒光感染不一定為細胞最佳 MOI 值,因為可能會造成細胞慢病毒感染拷貝數太高,影響細胞狀態。


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