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本生(天津)健康科技有限公司
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本生闡述:ELISA檢測試劑盒進行各項實驗條件如何選擇

時間:2022/11/21閱讀:1258
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  本生闡述:ELISA檢測試劑盒進行各項實驗條件如何選擇


  使用ELISA檢測試劑盒進行試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應。

  在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:

  固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯yixi、聚苯yixi、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯yixi凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好。

  包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質包被的適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值大而蛋白量少的濃度。對于多數蛋白質來說通常為1~10μg/ml。

  除此之外還要注意以下事項:

  1.確定ELISA檢測試劑盒在有效期內;

  2.仔細閱讀說明書;

  3.按說明書確定所有試劑齊全(數量、體積);

  4.標本制備要規范,每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備,盡量分裝做備份。短期內無法實驗者,注意低溫保存;

  5.根據檢測標本數量確定所需試劑的量;

  6.準備好所有實驗額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機等;

  7.按說明書將所用試劑平衡至室溫,配制所需試劑。

  適應客戶:醫院檢驗科PCR實驗室,中心實驗室,肝病中心;第三方檢測機構,科研院所,大專院校,制藥廠,試劑生產廠家,疾控中心,檢驗檢疫。

  溫馨提示:不可用于臨床治療。


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