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兔子表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒實驗室使用說明書

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  以下是兔子表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒的實驗室使用說明綜合指南:

  BS-4200 兔子表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒 天津本生

  一、實驗原理

  采用雙抗體夾心法ELISA技術,通過包被抗兔EGF抗體捕獲樣本中的目標蛋白,依次加入HRP標記檢測抗體和TMB底物顯色,顏色深度與EGF濃度呈正相關。

  二、試劑盒組成

  組分 96孔配置 48孔配置

  預包被微孔板 1×96 1×48

  標準品(凍干粉) 0.5ml×1 0.5ml×1

  HRP標記抗體 6ml 3ml

  TMB顯色液 A/B液各6ml A/B液各3ml

  20×洗滌緩沖液 25ml 15ml

  終止液 6ml 3ml

  三、樣本處理要求

  血清/血漿?:采集后30分鐘內2-8℃離心(1000×g,20分鐘),-20℃保存避免反復凍融

  組織勻漿?:按1:9比例加入PBS勻漿,5000×g離心5-10分鐘取上清

  細胞上清?:1000×g離心20分鐘去除沉淀

  四、標準品配制

  加入1ml蒸餾水復溶凍干標準品,配成480pg/ml母液

  倍比稀釋建立標準曲線(建議濃度梯度:480/240/120/60/30/0 pg/ml)

  五、檢測步驟

  加樣?:標準品/樣本各加100μl,37℃孵育120分鐘

  洗滌?:1×洗滌液洗板4-6次,每次浸泡1-2分鐘

  加酶標抗體?:100μl/孔,37℃孵育60分鐘

  顯色?:加TMB避光反應10-20分鐘

  終止?:加終止液后30分鐘內450nm測OD值

  六、注意事項

  所有試劑使用前需平衡至室溫

  避免溶血/脂血樣本影響結果

  顯色液變藍即失效,不可使用

  不同批次試劑不可混用

  七、技術參數

  檢測范圍:15-480 pg/mL

  靈敏度:<15 pg/mL

  板內/板間變異系數:<10%

  注:以上資料僅供參考,建議實驗時設置復孔并同步制作標準曲線。具體操作細節可能因品牌差異需參考對應說明書。

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