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南京億迅生物科技有限公司
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尿素(Urea)檢測(cè)試劑盒(脲酶波氏比色法) 說明書

時(shí)間:2024/7/25閱讀:626
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產(chǎn)品名稱:尿素(Urea)檢測(cè)試劑盒(脲酶波氏比色法)

有效期:6個(gè)月有效。低溫運(yùn)輸,按要求保存。


產(chǎn)品簡介:

尿素(Urea)又稱碳酰胺(carbamide),是哺乳動(dòng)物和某些魚類體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝分解的主要含氮終產(chǎn)物,也是目前含氮量最高的氮肥;尿素檢測(cè)方法大致分為化學(xué)方法和酶學(xué)方法后者被認(rèn)為是間接方法,先經(jīng)尿素酶(脲酶)分解尿素為銨離子,然后根據(jù)波氏反應(yīng)檢測(cè)銨離子的生成量。

尿素(Urea)檢測(cè)試劑盒(脲酶波氏比色法)檢測(cè)原理是尿素酶水解尿素,產(chǎn)生氨和二氧化碳,氨在堿性條件下與苯酚等反應(yīng)生成藍(lán)色吲哚酚,吲哚酚的生成量與尿素含量呈正比,通過分光光度計(jì)測(cè)定 560nm 處吸光度,可用于測(cè)定人體、動(dòng)物的血漿、血清、尿液等樣品中的尿素(舊稱尿素氮,BUN)含量,但尿液最好經(jīng)過處理后再行檢測(cè)。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。


操作步驟(僅供參考):

1、準(zhǔn)備樣品:

①血漿、血清:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,直接用于尿素的測(cè)定,-20℃凍存。

②尿液:尿液樣品最好處理后測(cè)定,方法如下:取 0.6ml 尿液樣品,加入沸石 0.3g,加入無氨蒸餾水至 15ml,反復(fù)震蕩數(shù)次,吸附尿液中的游離銨鹽,靜置后,吸取稀釋尿液所測(cè)結(jié)果乘以 25,如果尿液比較少,可以等比例減少各試劑的使用量。舉例:取 1ml,尿液樣品,應(yīng)加入沸石 0.5g,加入無氨蒸餾水至 25m,反復(fù)震蕩數(shù)次,吸附尿液中的游離銨鹽,靜置后,吸取稀釋尿液,所測(cè)結(jié)果乘以 25。

2、配制標(biāo)準(zhǔn)品工作液:取適量的尿素標(biāo)準(zhǔn)(100mmol/L),按尿素標(biāo)準(zhǔn)(100mmol/L):ddH,0=1:19 的比例混合,使尿素濃度達(dá)到 5mmol/L,即為標(biāo)準(zhǔn)品工作液-尿素標(biāo)準(zhǔn)(5mmol/L);4℃℃保存,1 周有效。

3、配制脲酶工作液:取適量的脲酶溶液,按脲酶溶液:脲酶稀釋液=1:99 的比例混合即為脲酶工作液;4℃避光保存,1個(gè)月有效。

4、Urea 加樣:按照下表設(shè)置空白管、標(biāo)準(zhǔn)管、測(cè)定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并注意避免產(chǎn)生氣泡;如果樣品中的 Urea 濃度過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。

5、Urea 測(cè)定:充分混勻,37℃水浴20min,分光光度計(jì)檢測(cè)560nm處吸光度,比色杯光徑 1.0cm,空白管調(diào)零, 讀取各管吸光度,分別為 A 標(biāo)準(zhǔn)、A 測(cè)定。


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