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Magnetofection™ 是一種簡(jiǎn)單且高效的方法轉(zhuǎn)染方法可轉(zhuǎn)染原代細(xì)胞和難轉(zhuǎn)染細(xì)胞。

Magnetofection™ 的原理是將核酸、轉(zhuǎn)染試劑或病毒與特定的磁性納米粒子結(jié)合起來(lái)。然后將所得的分子復(fù)合物濃縮并運(yùn)輸?shù)接蛇m當(dāng)磁場(chǎng)支持的細(xì)胞中。通過(guò)這種方式，利用施加在基因載體上的磁力可以將所施加的全部載體劑量非常快速地集中在細(xì)胞上，從而使 100% 的細(xì)胞與有效的載體劑量接觸，并促進(jìn)細(xì)胞攝取。

它是如何工作的？

磁性納米顆粒由氧化鐵制成，可生物降解，并根據(jù)應(yīng)用涂有特定的專(zhuān)有陽(yáng)離子分子。它們與基因載體（DNA、siRNA、ODN、病毒等）的結(jié)合是通過(guò)鹽誘導(dǎo)的膠體聚集和靜電相互作用來(lái)實(shí)現(xiàn)的。然后，通過(guò)特定磁板產(chǎn)生的外部磁場(chǎng)的影響，磁性顆粒被濃縮到細(xì)胞上。遺傳物質(zhì)的細(xì)胞攝取是通過(guò)胞吞作用和胞飲作用這兩個(gè)自然生物過(guò)程來(lái)完成的。因此，與破壞細(xì)胞膜、產(chǎn)生孔洞或電擊細(xì)胞膜的其他物理轉(zhuǎn)染方法相比，膜結(jié)構(gòu)和結(jié)構(gòu)保持完整。然后，根據(jù)所使用的制劑，通過(guò)不同的機(jī)制將核酸釋放到細(xì)胞質(zhì)中。

1. 首先是納米顆粒上包覆的陽(yáng)離子聚合物引起的質(zhì)子海綿效應(yīng)，促進(jìn)內(nèi)體滲透膨脹、內(nèi)體膜破壞和細(xì)胞內(nèi) DNA 釋放。

2. 其次是顆粒上包被的陽(yáng)離子脂質(zhì)使內(nèi)體不穩(wěn)定，通過(guò)細(xì)胞負(fù)性脂質(zhì)的翻轉(zhuǎn)和電荷中和將核酸釋放到細(xì)胞中。

3. 第三個(gè)是使用病毒時(shí)通常的病毒機(jī)制。

磁性納米顆粒的生物分布

可生物降解的陽(yáng)離子磁性納米粒子在推薦劑量甚至更高劑量下沒(méi)有毒性。基因載體/磁性納米顆粒復(fù)合物在 10-15 分鐘后內(nèi)化到細(xì)胞中，即比任何其他轉(zhuǎn)染方法快得多。 24、48 或 72 小時(shí)后，大多數(shù)顆粒位于細(xì)胞質(zhì)、液泡（細(xì)胞周?chē)Y(jié)構(gòu)的膜）中，偶爾位于細(xì)胞核中。此外，磁性納米粒子不影響細(xì)胞功能。

有哪些應(yīng)用？

Magnetofection™ 是適用于所有類(lèi)型核酸（DNA、siRNA、dsRNA、shRNA、mRNA、ODN...）、非病毒轉(zhuǎn)染系統(tǒng)（轉(zhuǎn)染試劑）和病毒的通用技術(shù)。

如何使用 Magnetofection™ 試劑？

該方案是一個(gè)非常簡(jiǎn)單的程序：
1. 在無(wú)血清培養(yǎng)基或緩沖液中稀釋核酸或載體，并添加 Magnetofection™ 試劑。
2. 孵育 20-30 分鐘。
3. 將這些復(fù)合物直接添加到細(xì)胞中。
4.施加磁場(chǎng)（將培養(yǎng)板放在磁力板上）。
5. 孵育5-20分鐘，取出磁板并培養(yǎng)細(xì)胞直至測(cè)定。

需要特定的設(shè)備嗎？

Magnetofection™ 要求是磁板專(zhuān)為此應(yīng)用而設(shè)計(jì)。磁性板是一次性購(gòu)買(mǎi)且可重復(fù)使用，因此您不需要與電穿孔或基因槍等方法相反的昂貴設(shè)備?；旧希璧拇艌?chǎng)是由特定的磁鐵產(chǎn)生的。三種磁性板可供選擇：超級(jí)磁性板、具有 96 個(gè)磁鐵的磁性板和巨型磁性板。他們的設(shè)計(jì)允許產(chǎn)生異質(zhì)磁場(chǎng)，磁化溶液中的納米顆粒，形成非常強(qiáng)的梯度以吸引納米顆粒并覆蓋板的所有表面。該板可用 70% 乙醇清洗并在培養(yǎng)箱或機(jī)器人中使用。