SPRI 技術(shù)是一種先進(jìn)的方法，可根據(jù)核酸的類型和大小選擇性、可逆地將核酸與順磁珠結(jié)合。該技術(shù)在精確提取、純化、清潔和尺寸選擇核酸方面提供了高性能。
該技術(shù)于 20 世紀(jì) 90 年代由麻省理工學(xué)院懷特海德研究所開發(fā)，在人類基因組計(jì)劃中發(fā)揮了至關(guān)重要的作用，特別是在桑格測序方案的 PCR 產(chǎn)物純化中。
我們的基因組試劑利用了 SPRI 技術(shù)的力量，使他們能夠生產(chǎn)高質(zhì)量的核酸樣本，并在基因組研究中提供可靠、準(zhǔn)確的結(jié)果。生產(chǎn)的樣品支持各種應(yīng)用，例如 qPCR、ddPCR、桑格測序、下一代測序 (NGS) 和微陣列分析。
每個(gè) SPRI 珠子的尺寸為 1 µm ± 8%，由一個(gè)有浮力的聚苯乙烯核心組成，周圍環(huán)繞著一層薄薄的磁鐵礦，使其具有順磁性，并且易于通過磁場進(jìn)行操作。 SPRI 珠子表面涂有羧基分子，為 DNA 結(jié)合提供電荷基團(tuán)。
作為 SPRI 試劑的組成部分，SPRI 微珠為核酸結(jié)合提供了堅(jiān)實(shí)的支持。我們的基因組試劑的兩個(gè)主要特點(diǎn)有助于 SPRI 微珠發(fā)揮其功能：
擁擠劑將特定大小的核酸從溶液中擠出。
結(jié)合緩沖液提供鹽離子并調(diào)節(jié) pH 以促進(jìn)核酸和珠子的結(jié)合。
| 主要特征 | 好處 |
|---|---|
| 順磁珠 | 在液體處理機(jī)上輕松實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化，例如Biomek i 系列自動(dòng)化工作站，無需離心或過濾 |
| 珠子尺寸均勻 | 高度可重復(fù)的結(jié)果 |
| 帶負(fù)電的表面 | 用水溶液洗脫，不使用離液鹽 |
| 非苯乙烯聚合物表面 | 低非特異性結(jié)合 |
| 高表面積質(zhì)量比 | 增加結(jié)合能力 |
| 快速磁響應(yīng)時(shí)間 | 快速純化 |
| 尺寸優(yōu)化 | 自動(dòng)化應(yīng)用的低沉降率 |
第一步：SPRI 珠子直接添加到樣品反應(yīng)中。在專有緩沖液存在的情況下，核酸與珠子表面結(jié)合。
第二步：使用磁場將微粒從溶液中拉出。污染物被吸出，微粒被清洗。
第三步：純化的核酸在水性條件下很容易從微粒上洗脫下來，這為下游應(yīng)用提供了最大的靈活性。
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