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病毒類樣品凍干方法介紹

閱讀:2256      發布時間:2022-5-20
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病毒是一種個體微小,結構簡單,只含一種核酸DNA或RNA,必須在活細胞內寄生并以復制方式增殖的非細胞型生物。病毒是一種非細胞生命形態,它由一個核酸長鏈和蛋白質外殼構成,病毒沒有自己的代謝機構,沒有酶系統。因此病毒離開了宿主細胞,就成了沒有任何生命活動、也不能獨立自我繁殖的化學物質。它的復制、轉錄、和轉譯的能力都是在宿主細胞中進行,當它進入宿主細胞后,它就可以利用細胞中的物質和能量完成生命活動,按照它自己的核酸所包含的遺傳信息產生和它一樣的新一代病毒。

冷凍干燥(Lyophilization)全稱真空冷凍干燥,簡稱凍干,是在低溫減壓條件下,利用水的升華使制品低溫脫水而達到干燥的一種技術。凍干在低溫低氧條件下進行,多數生物反應停滯,且處理過程無液態水存在,使物料原有結構和形狀得到大程度的保護。通過凍干獲得的粉體硬團聚少,粒徑小且均勻,已經成為制備生物制品,尤其是蛋白多肽類粉針劑的一種重要方法。

保護劑一般采用脫脂牛奶或血清、人血白蛋白、蔗糖、海藻糖、山梨醇、甘露醇等糖和多元醇類,HES淀粉、明膠、右旋糖苷、緩沖鹽等。保護劑的作用機理是在冷凍干燥的脫水過程中穩定病毒結構,防止細胞膜受冷凍或干燥而造成損傷。真空凍干病毒比較穩定,可于室溫短期保存, 4~8℃長期保存。此法綜合利用了各種有利于毒種保存的因素,具有成活率高,變異性小等優點,是常用的較理想的毒種保存方法之一。病毒疫苗凍干主要關注的是凍干后病毒滴度、殘余水分、熱穩定性、抗原性及相關免疫實驗。診斷不同的病毒毒株的特點采用不同的凍干保護劑組合進行凍干,凍干工藝曲線根據混合液體的玻璃態轉變溫度、塌陷溫度、共晶點溫度、共融點溫度等特點進行相應的預凍溫度,預凍時間,預凍工藝,升華干燥溫度,升華干燥時間,升華工藝及解析工藝的相關設計。任何物質的成功凍干都離不開好的配方保護劑和相應的凍干曲線。我公司可以提供相應的凍干工藝曲線及凍干配方開發服務。


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