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流式細胞技術科研實驗技術服務介紹
閱讀：273 發布時間：2024-9-24流式細胞技術
應用簡介
流式細胞技術（flowcytometry,FCM）是利用流式細胞儀進行的一種單細胞定量分析和分選技術。流式細胞術是單克隆抗體及免疫細胞化學技術、激光和電子計算機科學等高度發展及綜合利用的高技術產物。
技術原理
流式細胞儀使懸浮在液體中分散的經熒光標記的細胞或微粒逐個通過樣品池，同時由熒光探測器捕獲熒光信號并轉換成分別代表前向散射角、側向散射角和不同熒光強度的電脈沖信號，經計算機處理形成相應的點圖，直方圖和加三維結構圖像進行分析。用于FCM的樣本是單細胞懸液，可以是血液、懸浮細胞培養液、各種體液、新鮮實體瘤的單細胞懸液以及石蠟包埋組織的單細胞懸液等。
服務內容
1、細胞表面分子的檢測與分析；
2、細胞內或細胞核內抗原檢測與分析,如胞內細胞因子、調節性T細胞（Treg，CD4+CD25+Foxp3+）；
3、細胞凋亡的檢測與分析——如PI單染法、Annexin-V-PI復染法、末端轉移酶標記技術（TUNEL）、細胞周期特異性細胞凋亡的檢測（PI-Annexin-V，PA法）；
4、DNA含量檢測與細胞周期的分析——如藥物對細胞周期的影響、流式細胞核型分析；
5、細胞增殖的檢測與分析；
流式細胞分選儀基本原理
技術特點1、少量細胞分選時，流式細胞分選精確度高（99%以上），速度快。目前，先進的流式細胞儀的分選速度可達25000個細胞/秒以上，比傳統的分選速度提高了很多倍，原來需要一天的工作現在只需要幾小時就能完成。不過流式細胞儀分離細胞的量還是有一定的限制，一次分離的最大合理量約為108個細胞。如果細胞量超過109個，則需要耗費10小時以上，分選后細胞的活力會受到很大的影響。
2、可以同時進行多個Marker分選，正選負選同時進行。以前的流式細胞儀只能給液滴充上正電荷或負電荷，因此在電場中只能向左或向右偏轉，即兩路分選。現在的儀器可以給液滴充以不同的電量，從而調整液滴的偏轉角度，實現多路分選。BD的FACSAria流式細胞儀就可以進行四路分選。
3、不僅僅限于表面抗原，流式細胞儀可以根據任何能檢測到的發光度（如細胞體積）或熒光（如DNA、RNA或蛋白含量，酶活性，特異抗原）散射度差異來分離細胞。如果能保證流式細胞儀的無菌狀態，那么分選后的細胞還可以進行培養或其他分析。
4、如果只是偶爾做幾次細胞分選的話，用流式分選還是比較劃算的，只需要準備樣品和抗體，交納一定的儀器使用費即可，不需要購買配套的設備。