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詳細(xì)介紹
rLV-Ubi-LifeAct慢病毒載體 現(xiàn)貨
rLV-Ubi-LifeAct慢病毒載體 現(xiàn)貨
應(yīng)用領(lǐng)域
- 細(xì)胞骨架組織：
-無毒肌動蛋白可視化
-熒光染色 - 細(xì)胞骨架動力學(xué)：
-細(xì)胞過程中的肌動蛋白動力學(xué)
- 活細(xì)胞成像和顯微鏡檢查
技術(shù)特點(diǎn)
- *的生物相容性-活體樣品的無毒染色
- 容易產(chǎn)生穩(wěn)定的細(xì)胞系
- 用于體外和體內(nèi)應(yīng)用
技術(shù)指標(biāo)
| 濃度 | 1 x 10 7 TU /毫升 |
| 存儲 | -80°攝氏度 |
| TagGFP2（Ex max / Em max） | 483/506納米 |
| TagRFP（Ex max / Em max） | 555/584納米 |
注意：
請注意，您將使用包含傳染性病毒的產(chǎn)品。對于所有含有BSL-2生物的材料，遵循推薦的NIH指南。
了解更多
請在此處找到有關(guān)肌動蛋白可視化的更多詳細(xì)信息。
在此處下載完整的“ Actin可視化”應(yīng)用指南，以PDF格式。
LifeAct是一種17個氨基酸的肽，來源于釀酒酵母的一種蛋白質(zhì)。LifeAct對活的或固定的真核細(xì)胞和組織中的絲狀肌動蛋白（F-actin）結(jié)構(gòu)進(jìn)行染色。
請在此處找到有關(guān)LifeAct的詳細(xì)信息。
源自人類免疫缺陷病毒（HIV-1）的慢病毒載體已成為將基因傳遞至哺乳動物細(xì)胞的主要工具。慢病毒載體的利特征是能夠在體外和體內(nèi)介導(dǎo)有效的轉(zhuǎn)導(dǎo)，整合和長期表達(dá)進(jìn)入分裂和非分裂細(xì)胞的能力。
具有水泡性口炎病毒包膜G（VSV-G）蛋白的假型包膜擴(kuò)大了靶細(xì)胞范圍。慢病毒載體現(xiàn)已顯示可將基因傳遞至神經(jīng)元，淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。先前的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體無法用于這些細(xì)胞類型。此外，慢病毒載體已被證明可有效地體內(nèi)轉(zhuǎn)導(dǎo)腦，肝，肌肉和視網(wǎng)膜，而無任何毒性作用或免疫反應(yīng)。
所提供的慢病毒是VSV-G假型泛嗜性病毒，它既可以感染分裂細(xì)胞也可以感染非分裂細(xì)胞，同時能夠穩(wěn)定整合到細(xì)胞基因組中。
用rLV-LifeAct轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞后，使用熒光標(biāo)記TagGFP2或TagRFP **可視化F-肌動蛋白。使用這種方法，即使在難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型（例如原代細(xì)胞（例如神經(jīng)元細(xì)胞））中，也可以實(shí)現(xiàn)高達(dá)100％的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。該病毒可用于產(chǎn)生穩(wěn)定的細(xì)胞系，并可通過熒光分選選擇穩(wěn)定的克隆。
當(dāng)需要瞬時或穩(wěn)定表達(dá)LifeAct時，LifeAct質(zhì)?？捎糜谠S多細(xì)胞類型。在這種情況下，研究人員可以在兩種不同的啟動子之間進(jìn)行選擇：CMV（巨細(xì)胞病毒）或CAG（修飾的雞β-肌動蛋白）。
腺病毒載體可用于難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞，或需要高達(dá)100％轉(zhuǎn)基因表達(dá)的細(xì)胞。在這種情況下，也可以在前面提到的兩個啟動子之間進(jìn)行選擇。這些載體適用于僅需要LifeAct-TagGFP2或LifeAct-TagRFP瞬時表達(dá)的應(yīng)用。
方法比較：使用LifeAct在活細(xì)胞中可視化F-Actin
LifeAct-Plasmid | LifeAct-mRNA | LifeAct蛋白 | LifeAct- | LifeAct- | |
| 方法適用于1 | |||||
| 細(xì)胞系 | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ |
| 原代細(xì)胞 | + | +++ | ++ | +++ | +++ |
| 非哺乳動物細(xì)胞 | -- | + | + | -- | -- |
| 轉(zhuǎn)染穩(wěn)定性 | |||||
| 短暫的 | 是 | 是 | 是 | 是 | 沒有 |
| 穩(wěn)定 | 是 | 沒有 | 沒有 | 沒有 | 是 |
| 協(xié)議與分析 | |||||
| 協(xié)議簡單 | +++ | ++ | ++ | +++ | +++ |
| LifeAct讀出開始 | 1-2天 | 幾個小時 | 幾分鐘 | 1-2天 | 1-2天 |
| LIFEACT讀出持續(xù)時間 | 幾天 | 幾天 | 多1天 | 幾天 | 幾天 |
| 信號強(qiáng)度 | +++ | +++ | + | +++ | +++ |
| 額外好處 | |||||
| 防止過度表達(dá)的 假象 | -- | + | +++ | + | + |
| 預(yù)防病毒反應(yīng) | +++ | +++ | +++ | -- | -- |
| 轉(zhuǎn)移 方法的生物相容性 | + | +++ | +++ | ++ | ++ |
| 肌動蛋白功能 | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ |
| 安全考慮 | |||||
| 生物安全等級 | BSL1 | -- | -- | BSL2 | BSL2 |
1并非所有這些組合都已在所有指示的細(xì)胞類型中進(jìn)行了測試。我們鼓勵您使用此表作為指導(dǎo)，以了解如何地使用LifeAct系統(tǒng)。
注：楊清辰發(fā)布
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