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C18色譜柱由哪些部件組成?操作時(shí)需要注意些什么?

閱讀:1783      發(fā)布時(shí)間:2022-12-16
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  C18色譜柱是一種裝填有固定相用以分離混合組分的柱管,一般為金屬或玻璃制作而成,有直管型、盤管型、U型管等,被廣泛用于多個(gè)領(lǐng)域中。色譜柱主要由那些部件組成呢?下面具體介紹一下色譜柱的組成部件,希望可以幫助到大家。
  色譜是一種分離分析手段,分離是核心,因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。對色譜柱的要求是柱效高、選擇性好,分析速度快等。市售的用于HPLC的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質(zhì)的鍵合相、氧化鋁、有機(jī)聚合物微球(包括離子交換樹脂)、多孔碳等,其粒度一般為3,5,7,10μm等,柱效理論值可達(dá)5~16萬/米。對于一般的分析只需5000塔板數(shù)的柱效;對于同系物分析,只要500即可;對于較難分離物質(zhì)對則可采用高達(dá)2萬的柱子,因此一般10~30cm左右的柱長就能滿足復(fù)雜混合物分析的需要。
  色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成,壓力不高于70 kg/cm2 時(shí),也可采用厚壁玻璃或石英管,管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。為提高柱效,減小管壁效應(yīng),不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過拋光。也有人在不銹鋼柱內(nèi)壁涂敷氟塑料以提高內(nèi)壁的光潔度,其效果與拋光相同。還有使用熔融硅或玻璃襯里的,用于細(xì)管柱。色譜柱兩端的柱接頭內(nèi)裝有篩板,是燒結(jié)不銹鋼或鈦合金,孔徑0.2~20µm(5~10?m),取決于填料粒度,目的是防止填料漏出。
  C18色譜柱使用正確十分重要,操作色譜儀稍有不慎就可能會(huì)降低柱效縮短其使用壽命甚至損壞。在它的操作過程中需要注意下列問題。
  ① 避免溫度和壓力的急劇變化以及任何機(jī)械震動(dòng)。溫度的突然變化或使色譜柱從高處掉下都會(huì)影響到柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的突然降低或升高也會(huì)影響到柱內(nèi)填料,因此在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該逐漸緩慢操作,但是進(jìn)樣閥的轉(zhuǎn)動(dòng)不能過緩。
  ② 應(yīng)該逐漸改變試樣樣品溶劑的組成,特別是在反相色譜中不應(yīng)該把有機(jī)溶劑直接改變?yōu)樗粗嗳弧?/div>
  ③ 一般情況下色譜柱不可以反沖,只有廠家說明色譜柱可以反沖時(shí)才可以使用反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖就會(huì)迅速降低色譜柱效。
  ④ 選擇使用適宜的流動(dòng)相可以避免液相色譜儀固定相被破壞,還可以在進(jìn)樣器前面連接一根預(yù)柱,分析柱為鍵合硅膠時(shí)則預(yù)柱為硅膠,能夠使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠飽和可以避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。

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