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產品名稱：CryoStor CS10 細胞DMSO凍存液 GMP臨床級

產品貨號：210102

四種細胞凍存液

 BioLife Solutions CryoStor CS10  GMP臨床級凍存液

CryoStor CS10細胞凍存液特點

用于細胞和組織的高級生物保存液

預混DMSO

無血清、無蛋白

USP級高質量成分、cGMP級生產、FDA master文件

滅菌、內毒素和細胞功能檢測

DMSO無血清GMP臨床級凍存液適用細胞

多種類型細胞，包括如肝細胞之類的敏感細胞

BioLife Solutions CryoStor CS10 細胞DMSO凍存液GMP臨床級生產

MATERIALS ARE MANUFACTURED UNDER cGMP

CryoStor使用說明書

準備細胞

1. 待冷凍細胞配制懸液（機械法或酶法解離）。

2. 細胞懸液離心獲得沉淀。

3. 去除上清液 - 注意：盡可能多地移除培養基，以降低CryoStor®凍存液被稀釋程度。

細胞凍存

4. 分離：加入預冷的（2-8°C）CryoStor®凍存液。

a. 細胞密度：0.5-10×10⁶  細胞/ mL，常規細胞培養方案（細胞密度可以更高）。

b. CryoStor®凍存液已經混合了DMSO，不需要再添加其他任何凍存劑。

5. 預冷：細胞/CryoStor®混合懸液2-8°C孵育約10分鐘。

6. 成核：-70°C冷凍樣品（許多方案交替使用-70°C和-80°C）

a. 大多數哺乳動物細胞，使用程序降溫法 (-1°C/min)或類似方法。

b. 程序降溫盒或異丙醇容器需要預冷到 2-8°C。

c. 約-5℃時 （-70°C冷凍約15-20min后）啟動樣品內的冰核形成（seeding），啟動方法可以是程序降溫儀控制的液氮噴放或是機械攪拌樣本（輕彈或輕拍）。

d. 使用異丙醇容器的冷凍時間（-70°C）建議為3-4小時。

保存樣本

7.樣本保存

a. 長時保存溫度液氮-130°C以下。

b.  -80°C 保存建議只能用于短時期保存，幾周到幾月。

樣本解凍

8. 解凍復蘇：37°C水浴快速解凍樣本。

a. 解凍時輕輕搖晃，直到看不到任何冰塊。1mL凍存管樣本解凍時間大約3分鐘。

b. 樣本不能在結冰點以上加熱（0-10°C）。水浴中拿出來時，凍存管觸感是冷的。不推薦被動解凍。

9. 立即用培養基稀釋細胞/CryoStor®混合物。

a. 稀釋步驟可以一步完成。

b. 稀釋用培養基溫度為20°C到 37°C。

c. 推薦稀釋比例≥1:10 （樣本：培養基）

10.合適的條件下培養細胞。

11. 使細胞進入培養環境或立即使用細胞。

12. 解凍后24h進行細胞活力檢測。*

注意：細胞活力檢測應該在解凍后24h進行，以保證結果準確，并且以非冷凍樣本作為對照。

*解凍后立即使用細胞膜完整性指示劑進行樣本檢測，如臺盼藍，分析樣本細胞產量和活力，結果一般會高于正常值。

推薦使用更準確的活力檢測方法，活死細胞熒光分析或代謝分析（MTT or alamarBlue®）。

同時推薦視覺觀察方法，細胞貼壁和“漂浮”情況。

產品名稱：CryoStor CS10 細胞DMSO凍存液 GMP臨床級

產品貨號：210102

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