化工儀器網
技術文章
巴布亞旋毛蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒樣品RNA的抽提
閱讀：1191 發布時間：2022-4-26巴布亞旋毛蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒樣品RNA的抽提：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇（75%乙醇用DEPCH2O配制），清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA質量檢測
1）紫外吸收法測定
先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋（1:100）后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
① 濃度測定
A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計算公式為：A260 ×稀釋倍數× 40 g/ml。
淡豆豉染料法PCR鑒定試劑盒
膽南星染料法PCR鑒定試劑盒
丹參染料法PCR鑒定試劑盒
淡竹葉染料法PCR鑒定試劑盒
黨參染料法PCR鑒定試劑盒
當歸染料法PCR鑒定試劑盒
稻芽染料法PCR鑒定試劑盒
燈心草染料法PCR鑒定試劑盒
地膚子染料法PCR鑒定試劑盒
地骨皮染料法PCR鑒定試劑盒
地黃染料法PCR鑒定試劑盒
地龍染料法PCR鑒定試劑盒
地榆染料法PCR鑒定試劑盒
丁香染料法PCR鑒定試劑盒
冬蟲夏草染料法PCR鑒定試劑盒
冬瓜皮染料法PCR鑒定試劑盒
獨活染料法PCR鑒定試劑盒
杜仲染料法PCR鑒定試劑盒
莪術染料法PCR鑒定試劑盒
兒茶染料法PCR鑒定試劑盒
法半夏染料法PCR鑒定試劑盒
番瀉葉染料法PCR鑒定試劑盒
防風染料法PCR鑒定試劑盒
防已染料法PCR鑒定試劑盒
榧子染料法PCR鑒定試劑盒
粉萆薢染料法PCR鑒定試劑盒
佛手染料法PCR鑒定試劑盒
茯苓染料法PCR鑒定試劑盒
覆盆子染料法PCR鑒定試劑盒
浮萍染料法PCR鑒定試劑盒