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上海莼試生物技術(shù)有限公司 |
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人神經(jīng)絲蛋白H英文名稱：Human NF-H ELISA Kit產(chǎn)品別名：人NF-H elisa試劑盒用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Human NF-H ELISA Kit |
貨號(hào) | CS-E4023 |
試劑配制：
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
樣本處理及要求：
1. 血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)一夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測(cè)。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：請(qǐng)1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng)：
1.使用前請(qǐng)保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完，請(qǐng)廢棄。
2. 微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置，會(huì)使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請(qǐng)1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?，F(xiàn)象，微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。
（加熱溫度不要超過(guò)50℃）使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫。
4. 不同批號(hào)的試劑盒組份避免混用（洗滌液和反應(yīng)終止液除外）。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要，使用微量振蕩器，如無(wú)微量振蕩器，可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測(cè)時(shí)建議作雙孔檢測(cè)。
7. 試驗(yàn)中所用的試管和吸頭均為一次性使用，嚴(yán)禁在不同的液體之間混用！否則將影響試驗(yàn)結(jié)果。
8. 試驗(yàn)中請(qǐng)穿著試驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測(cè)血液或者其他體液標(biāo)本時(shí)，請(qǐng)按國(guó)家生物試驗(yàn)室安全防護(hù)條列執(zhí)行。
以下是公司正在*的產(chǎn)品：
通用型組織對(duì)氧酶1（PON1）有機(jī)酸酶活性熒光定量檢測(cè)試盒Human Pancreatic carcinoma markers-CA242 ELISA Kit 人胰腺癌標(biāo)志物CA242
通用型血液對(duì)氧酶1（PON1）有機(jī)酸酶活性熒光定量檢測(cè)試盒Human Gastrointestinalcancer Marker-CA199 ELISA Kit 人胃腸癌標(biāo)志物CA199
細(xì)胞對(duì)氧酶1（PON1）芳香酯酶活性比色法定量檢測(cè)試盒Human mammary carcinoma Marker-CA153 ELISA Kit 人乳腺癌標(biāo)志物-CA153
組織對(duì)氧酶1（PON1）芳香酯酶活性比色法定量檢測(cè)試盒Human ovarian cancer marker-CA125 ELISA Kit 人卵巢癌標(biāo)志物CA125
血液對(duì)氧酶1（PON1）芳香酯酶活性比色法定量檢測(cè)試盒AFP(Human Alpha-fetoprotein) ELISA Kit 人種胎兒球蛋白/胎蛋白
細(xì)胞對(duì)氧酶1（PON1）芳香酯酶活性比色法定量檢測(cè)試盒CEA/CD66(Human carcinoembryonic antign) ELISA Kit 人癌胚抗原
組織對(duì)氧酶1（PON1）內(nèi)酯酶活性比色法定量檢測(cè)試盒TIMP-4(Human tissue inhibitors of metalloproteinase 4) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4
人神經(jīng)絲蛋白HELISA試劑盒血液對(duì)氧酶1（PON1）內(nèi)酯酶活性比色法定量檢測(cè)試盒TIMP-3(Human tissue inhibitors of metalloproteinase 3) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3
細(xì)胞對(duì)氧酶2（PON2）活性比色法定量檢測(cè)試盒TIMP-2(Human tissue inhibitors of metalloproteinase 2) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2
組織對(duì)氧酶2（PON2）活性比色法定量檢測(cè)試盒OSM(Human Oncostatin-M) ELISA KIT 人抑瘤素M
細(xì)胞對(duì)氧酶3（PON3）活性比色法定量檢測(cè)試盒SP-D(Human Pulmonary surfatcant-associated protein D) ELISA Kit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D
組織對(duì)氧酶3（PON3）活性比色法定量檢測(cè)試盒SP-C(Human Pulmonary surfatcant-associated protein C) ELISA Kit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C
細(xì)胞對(duì)氧酶3（PON3）活性熒光定量檢測(cè)試盒SP-B(Human Pulmonary surfatcant-associated protein B) ELISA Kit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B
組織對(duì)氧酶3（PON3）活性熒光定量檢測(cè)試盒SP-A(Human Surfactant Protein A) ELISA Kit 人表面活性蛋白A
動(dòng)物細(xì)胞還原酶（aldo-keto reductase）總活性比色法定量檢測(cè)試盒MP-Ab(Human Mycoplasma pneumoniae antibody) ELISA Kit 人肺炎支原體抗體Bovine SOD1(Superoxide dismutase [Cu-Zn]) ELISA Kit
Bovine SOD1(Superoxide dismutase [Cu-Zn]) ELISA KitZNF23英文名稱：TNMDMaFF相關(guān)蛋白體
化學(xué),固相合成, 2,4-二芐
SAP62英文名稱：TGF Beta 1糖脂轉(zhuǎn)移蛋白結(jié)構(gòu)域2抗體
ZDHHC17英文名稱：TXA2R凝血因子7體
化學(xué),合成試, 反式-3-羥肉桂
phospho-Stathmin 1 (Ser63)英文名稱：TGF beta 2 Propeptide高爾基體膜相關(guān)蛋白6樣蛋白4抗體
ZNF312B英文名稱：TLR11FEM1B體
化學(xué),合成試, 伯森坦
phospho-Stathmin 1 (Ser24)英文名稱：TGF beta 3 propeptide胞漿區(qū)相關(guān)蛋白GIPC2抗體
操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。
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