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Curiosis血細胞計數板除了要會用，還要注意這些事情！
閱讀：2792 發布時間：2020-12-11
Curiosis血細胞計數板在顯微鏡下直接計數，是一種常用的微生物計數方法。此法的優點是直觀、快速。將經過適當稀釋的菌懸液（或孢子懸液）放在血細胞計數板載玻片與蓋玻片之間的計數室中，在顯微鏡下進行計數。由于計數室的容積是一定的（0.1或0.4mm2），所以可以根據在顯微鏡下觀察到的微生物數目來換算成單位體積內的微生物總數目。由于此法計得的是活菌體和死菌體的總和，故又稱為總菌計數法。適用于稀釋的菌懸液（或孢子懸液），即液體培養基中菌體的計數。
Curiosis血細胞計數板操作步驟：
1．稀釋
將釀酒酵母菌懸液進行適當稀釋，菌液如不濃，可不必稀釋。
2．鏡檢計數室
在加樣前，先對計數板的計數室進行鏡檢。若有污物，則需清洗后才能進行計數。
3．加樣品
將清潔干燥的血細胞計數板蓋上蓋玻片，再用無菌的細口滴管將稀釋的釀酒酵母菌液由蓋玻片邊緣滴一小滴（不宜過多），讓菌液沿縫隙靠毛細滲透作用自行進入計數室，一般計數室均能充滿菌液。（此處浙科版課本P73有誤）注意不可有氣泡產生。
4．顯微鏡計數
靜止5分鐘后，將血細胞計數板置于顯微鏡載物臺上，先用低倍鏡找到計數室所在位置，然后換成高倍鏡進行計數。在計數前若發現菌液太濃或太稀，需重新調節稀釋度后再計數。一般樣品稀釋度要求每小格內約有5—10個菌體為宜。每個計數室選4或5個中格中的菌體進行計數。
鏡檢計數方法：①方格內細胞的計數順序為左上→右上→右下→左下。②壓在方格線上的細胞只計左線和上線上的細胞數。③酵母細胞若有粘連，要數出團塊中的每一個細胞。④出芽酵母的芽體體積若超過細胞體積的1/2，則算獨立個體。⑤計數總數不少于300個細胞。
5．清洗血細胞計數板
使用完畢后，將血細胞計數板在水籠頭上用水柱沖洗，切勿用硬物洗刷，洗完后自行晾干或用吹風機吹干。鏡檢，觀察每小格內是否有殘留菌體或其他沉淀物。若不干凈，則必須重復洗滌至干凈為止。
Curiosis血細胞計數板注意事項：
（1）進行計數前，應先將試管搖勻，目的是使酵母菌在培養液中混合均勻，以減少計數誤差。
（2）顯微鏡計數時，對于壓在小方格界線上的酵母菌，應取相鄰兩邊及頂角計數。
（3）若一個小方格內酵母菌數量過多，難以數清時，則可將培養液稀釋一定倍數后再計數。
（4）本實驗無另設對照實驗，酵母菌每天的數量變化可形成前后對照。
（5）血細胞計數板使用后，切勿用硬物洗刷，可采用浸泡和沖洗的方法清洗。