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你還在為細胞計數過程中的碎片和雜質干擾而煩惱嗎?

閱讀:513        發布時間:2021-4-7
單細胞測序技術(scs)是指在單個細胞水平上對其攜帶的遺傳信息進行測序,獲得某種細胞類型的基因序列等信息并進行整合分析,目前廣泛應用于新物種鑒定、病原篩查、病原進化、發育生物學、神經科學、腫瘤異質性研究以及循環腫瘤細胞等。該技術在2013年榮膺《自然-方法》年度技術。目前主要的方法為10x Genomics。
單細胞測序技術實例
1. 多重退火和成環循環擴增技術主要研發人:哈佛大學終身教授、美國科學院院士謝曉亮教授技術看點:降低PCR擴增偏倚,使得單細胞中93%的基因組能夠被測序。這種方法使得檢測單細胞中較小的DNA序列變異變得更容易,因此能夠發現個別細胞之間的遺傳差異。2. 基于芯片實驗室技術的單細胞測序主要研發人:斯坦福大學Stephen Quake技術看點:基于lap on a chip開發3. 基于MDA的單細胞測序主要研發人:深圳華大基因研究院技術看點:將多重置換擴增(MDA)和測序技術相結合4. Strand-seq主要研發人:加拿大英屬哥倫比亞大學Peter Lansdorp技術看點:能捕捉DNA一條鏈上的信息,使得研究人員對于親本DNA模板鏈進行DNA測序,避免單細胞DNA擴增和測序時丟失定向信息
收樣與樣本制備過程中的注意事項
1. 樣本類型:細胞(植物細胞需要制備成原生質體)、組織(一般需要鮮樣不可冷凍)、血液2.最適上機檢測濃度:7x105-1.2x106個/ml3.細胞活率:細胞活率大于70%4. 細胞大小:小于40μm5.細胞結團率:小于10%

  

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