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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
椎間盤 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X8313 |
細胞簡介：
人終板軟骨分離自椎間盤終板軟骨組織；椎體終板是椎體在生長發育過程中， 椎體上下面的骨骺板骨化停止后形成骨板，呈輕度凹陷，即為骨性終板。椎體終板的中央仍為一薄層透明軟骨覆蓋，并終生存在，即為軟骨終板，上下軟骨終板與髓核和纖維環連接共同構成椎間盤。椎體終板構成了椎間盤的上下邊界，位于椎體中心的松質骨和椎間盤之間。是由軟骨下骨和厚度相當的覆蓋其上的軟骨組成。主要作用是防止椎間盤髓核組織嵌入椎體，同時具有平衡分散應力的作用。成熟的終板軟骨細胞多2-8個成群分布于軟骨陷窩內，這些終板軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成，稱為同源細胞群。電鏡下，終板軟骨細胞有突起和皺褶，細胞質內有大量的粗面內質網和發達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中，終板軟骨細胞收縮為不規則形，在軟骨囊和細胞之間出現較大的腔隙。體外培養的終板軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡介：
實驗室分離的人終板軟骨采用膠原酶 - 聯合消化并結合軟骨細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
實驗室分離的人終板軟骨經Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
培養基：含FBS、EGF、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每3-4天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態：梭形、多角形
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
人終板軟骨體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品：
豬可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISAKit ELISA.
豬白介素13(IL-13)ELISAKit ELISA.
豬轉化生長因子β2(TGF-β2)ELISAKit ELISA.
豬E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISAkit ELISA.
豬流行性腹瀉病毒抗體(PEDV)試劑盒
Human basic fibroblast growth factor (bFGF) ELISA Kit 人堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)試劑盒
PorcineMethemoglobin,MHBELISAKit 豬高鐵血紅蛋白(MHB)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAmAC-1(HumanAlternativemacrophageactivation-associatedCCchemokine1)ELISAKit人巨噬細胞替代激活相關化學因子1
血液果糖-1,6-二0酸縮酶(ALD)定量試劑盒20次
PorcineActivinA,ACV-AELISAKit豬活化素A(ACV-A)試劑盒
PAPLN蛋白多糖樣硫酸化糖蛋白抗體
同源盒基因HOXA3蛋白抗體
TNFRSF1B重組小鼠 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B 蛋白 Protein
ATM(ataxia telangiectasia mutated 0.5mgATM(ataxia telangiectasia mutated) 毛細血管擴張性共濟失調癥突變蛋白抗原
TPO重組人 Thyroid peroxidase / TPO 蛋白 (257 Ser/Ala, 725 Pro/Thr, His 標簽) Protein
APP Protein Human 重組人 Beta-amyloid 40 / Beta-APP40 蛋白 (His & GST 標簽)
CD40 Protein Rat 重組大鼠 CD40 / TNFRSF5 蛋白 (His 標簽)
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TNFRSF1B重組小鼠 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B 蛋白 Protein
CD40 Protein Rat 重組大鼠 CD40 / TNFRSF5 蛋白 (His 標簽)
TPO重組人 Thyroid peroxidase / TPO 蛋白 (257 Ser/Ala, 725 Pro/Thr, His 標簽) Protein
人終板軟骨細胞大鼠γ干擾素(IFNγ)試劑盒 ，英文名： IFNγ ELISA Kit
Rabbit soluble P selectin (sP-s 兔子可溶性P選擇素(sP-s
ELISA 小鼠巨嗜細胞性蛋白-1a(mouse MIP-1a/CCL3) 進口分裝
CLIAKitforIL-18ElisaKit大鼠白介素18
通用型鯉魚春季病毒血癥(SpringViraemiaofCarp;SVC)試劑盒20次
ELISAKitHO-2大鼠血紅素氧合酶2
原代細胞的培養條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
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