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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
腦 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 內皮細胞樣 | YS-01X8555 |
細胞簡介：
豬腦微血管內皮分離自腦組織；腦微血管內皮細胞是血腦屏障的主要組成成分，它是組成腦微血管腔面單層扁平上皮樣細胞，能夠限制可溶性物質和細胞等從血液進入大腦，大腦微血管內皮細胞與外周內皮細胞相比具有一些相同特性。它所產生和分泌的生物活性物質對維持血管張力、調節血壓、抗血栓形成等有重要作用，在腦血管疾病的發病機制中有重要病理生理學意義。與外周內皮細胞相同，大腦微血管內皮細胞表面表達細胞粘附分子，調控白細胞進入大腦。由于微血管內皮細胞的器官特異性，內皮細胞通常取源于疾病研究的相關組織。其主要特征如下：①腦微血管內皮細胞存在許多細胞間緊密連接，產生很高的跨內皮阻抗，延遲細胞旁的通量；②腦微血管內皮細胞缺乏內皮細胞的窗孔結構，其液相物質胞飲水平較低；③腦微血管內皮細胞具有不對稱定位酶和載體介導轉運系統，從而產生“兩極分化"的表現型。
方法簡介：
實驗室分離的豬腦微血管內皮采用膠原酶-混合消化法結合密度梯度離心法、后通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
實驗室分離的豬腦微血管內皮經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養基：基礎培養基，含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態：內皮細胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%
培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
豬腦微血管內皮體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品：
豬免疫球蛋白E(IgE)試劑盒 組裝/原裝
豬免疫球蛋白A(IgA)試劑盒 組裝/原裝
豬流行性腹瀉病毒抗體（PEDV）試劑盒 組裝/原裝
豬0酸化細胞外信號調節激酶(pERK)試劑盒 組裝/原裝
FITC標記人CD11c單克隆抗體
酸性線粒體肌酸激酶抗體
CLEC4F重組大鼠 CLEC4F / CLECSF13 蛋白 Protein
Dynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 0.5mgDynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 ) 鳥苷三0酸酶-發動蛋白2抗體
BLNK重組人 BLNK / Ly-57 / SLP-65 蛋白 (His 標簽) Protein
ASGR1 Protein Human 重組人 ASGPR1 / ASGR1 蛋白 (His 標簽)
TIMP1 Protein Mouse 重組小鼠 TIMP1僀?僀
Dynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 0.5mgDynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 ) 鳥苷三0酸酶-發動蛋白2抗體
ASGR1 Protein Human 重組人 ASGPR1 / ASGR1 蛋白 (His 標簽)
CLEC4F重組大鼠 CLEC4F / CLECSF13 蛋白 Protein
TIMP1 Protein Mouse 重組小鼠 TIMP1 / TIMP / CLGI 蛋白
BLNK重組人 BLNK / Ly-57 / SLP-65 蛋白 (His 標簽) Protein
豬內皮型合酶(eNOS)試劑盒
Human thyroid peroxidase (TPO) ELISA Kit 人甲狀腺過氧化物酶(TPO)試劑盒
GuineapigTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit 豚鼠壞死因子α(TNF-α)試劑盒分裝
CLIAKitforAmylin(MouseAmylin)ELISAKit小鼠胰淀素
血液S轉移酶(GSHST)總活酶動力性比色法定量試劑盒20次
PorcineB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISAKit豬B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)試劑盒
豬腦微血管內皮細胞大鼠活化素A受體抗體IgM(ACV-RAb IgM)試劑盒 ，英文名： ACV-RAb IgM ELISA Kit
Rabbit pyridinium crosslinks (PY) ELISA Kit 兔交聯物(PY)試劑盒
桿菌(BA)核酸試劑盒 48T
CLIAKitforMousepituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAPELISAKit小鼠垂體腺苷酸環化酶激活肽
體液元素熒光定量試劑盒20次
ELISAKitPⅢNP人Ⅲ型前膠原肽
原代細胞的培養條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
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