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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
膀胱組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7088 |
細胞簡介：
兔膀胱平滑肌分離自膀胱組織；膀胱是主要由平滑肌細胞組成的中空器官，膀胱平滑肌的舒張和收縮使得膀胱分別儲存和排出尿液。膀胱平滑肌細胞表型的調控和可誘導一氧化氮合酶的表達與多種病理狀況有關，包括膀胱功能障礙。研究表明，組織缺氧抑制膀胱平滑肌細胞的增殖，膀胱平滑肌細胞的分化依賴于膀胱上皮細胞釋放的因子。膀胱平滑肌細胞外基質的分泌表型可通過細胞所經歷的機械變形頻率而改變。平滑肌是許多疾病中的共同路徑，因此，了解在疾病發生及持續過程中平滑肌怎樣變化，這是治療方法取得進展的重要一步。膀胱壁由三層組織組成，由內而外為黏膜層、肌層和外膜。其中，肌層主要由平滑肌構成。膀胱平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。體外培養膀胱平滑肌細胞不僅為組織工程膀胱、尿道提供種植細胞的必要手段，也是研究平滑肌瘤的基礎與前提。
原代細胞的培養條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介：
公司實驗室分離的兔膀胱平滑肌采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的兔膀胱平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態優良
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品：
兔胰島素樣生長因子1(rabbit IGF-1) 作用： ELISA 規格： 進口分裝
兔損傷分子-1(rabbit Kim-1) 作用： ELISA 規格： 進口分裝
兔瘦素(rabbit Leptin) 作用： ELISA 規格： 進口分裝
兔巨噬細胞癥蛋白-5(rabbit MIP-5) 作用： ELISA 規格： 進口分裝
小鼠α羥基脫氫酶(αHBDH)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat leptin (LEP) ELISA Kit 大鼠瘦素(LEP)試劑盒
HumanAndrogenBindingProtein,ABPELISAKit 人雄激素結合蛋白(ABP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCholicacid,CA試劑盒人膽酸(CA)試劑盒規格：96T/48T
總L-高半胱(Hcy)定量試劑盒50次
Humansecondarylymphoid-tissuechemokine,SLCELISAKit人二級淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)試劑盒規格：96T/48T
β1，3半乳糖轉移酶3抗體
磷酸化星形膠質細胞升高基因1抗體
HA重組甲型流感 H5N8 (A/duck/NY/191255-59/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
RXR Alpha(retinoid-X receptor alpha 0.5mgRXR Alpha(retinoid-X receptor alpha) 核受體RXRα抗原
CST7重組人 Cystatin 7 / CST7 蛋白 Protein
GSTM5 Protein Human 重組人 GSTM5 蛋白
IL12A Protein Human 重組人 IL12A / NKSF1 蛋白 (Fc 標簽)
RXR Alpha(retinoid-X receptor alpha 0.5mgRXR Alpha(retinoid-X receptor alpha) 核受體RXRα抗原
GSTM5 Protein Human 重組人 GSTM5 蛋白
HA重組甲型流感 H5N8 (A/duck/NY/191255-59/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
IL12A Protein Human 重組人 IL12A / NKSF1 蛋白 (Fc 標簽)
CST7重組人 Cystatin 7 / CST7 蛋白 Protein
兔膀胱平滑肌細胞大鼠顆粒酶K(GZMK)試劑盒 ，英文名： GZMK ELISA Kit
Mouse apolipoprotein E (Apo-E) ELISA Kit 小鼠載脂蛋白E(Apo-E)試劑盒
RatEpinephrine/Adrenaline,EPIELISAKit 大鼠(EPI)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforFSHELISAKit魚促卵泡素
細胞環氧化酶(CYCLOOXYGENASE-1)活性比色法定量試劑盒20次
RatPlateletFactor4,PF-4ELISAKit大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)試劑盒規格：96T/48T
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