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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
小腸 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7984 |
細胞簡介：
兔小腸隱窩上皮分離自小腸組織；小腸位于腹中，上端接幽門與胃相通，下端通過闌門與大腸相連，是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內，上連胃幽門，下接盲腸，分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內消化是至關重要的，因為食物經過小腸內胰液、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后，基本上完成了消化過程，同時營養物質被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構成。其結構特點是管壁有環形皺襞，粘膜有許多絨毛，絨毛根部的上皮下陷至固有層，形成管狀的腸腺，其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關系密切；構成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內分泌細胞與絨毛上皮相似，接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似，絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短，不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運動功能，其中以吸收和分泌功能為主。小腸腔面的環行皺襞從幽門附近開始出現，在十二指腸末段和空腸頭段極發達，向下逐漸減少和變矮，至腸中段以下基本消失。粘膜表面還有許多細小的腸絨毛，是由上皮和固有層向腸腔突起而成，形狀不一，以十二指腸和空腸頭段達。絨毛于十二指腸呈葉狀，于空腸呈指狀，于回腸則細而短。環行皺襞和絨毛使小腸表面積擴大20-30倍，絨毛根部的上皮下隱至固有層形成管狀的小腸腺，又稱腸隱窩，故小腸腺與絨毛的上皮是連續的，小腸腺直接開口于腸腔。
方法簡介：
實驗室分離的兔小腸隱窩上皮采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
實驗室分離的兔小腸隱窩上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態：上皮細胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔小腸隱窩上皮體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的優良培養狀態。
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品：
小鼠趨化因子(mouse RAES) 作用： ELISA 規格： 進口分裝
小鼠抵抗素(mouse Resistin) 作用： ELISA 規格： 進口分裝
小鼠可溶性破骨細胞異化因子(mouse sRANKL) 作用： ELISA 規格： 進口分裝
小鼠血清淀粉樣蛋白(mouse SAA) 作用： ELISA 規格： 進口分裝
小鼠神經營養因子3(-3)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human immunoglobulin heavy chain (IgH) ELISA Kit 重鏈(IgH)試劑盒
HumanPulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-AELISAKit 人肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Fishi-iodothyronine,T3試劑盒魚類三甲狀腺原(T3)試劑盒規格：96T/48T
真菌/酵母非蛋白/游離巰基含量比色法定量試劑盒20次
MouseCompleme1inhibitoraoaibody,C1INHELISAKit小鼠補體1抑制物抗體(C1INH)試劑盒規格：96T/48T
ARCH抗體
溶質載體家族蛋白20成員A1抗體
NA重組甲型流感 H3N2 神經酶 (Neuraminidase / NA) (E119V mutation) (高活性) Protein
PSCA 前列腺干細胞抗原 0.5mgPSCA 前列腺干細胞抗原
NOG重組人 Noggin / NOG 蛋白 Protein
COASY Protein Human 重組人 COASY / CoA synthase 蛋白
EPHB6 Protein Human 重組人 EphB6 / EphB6 蛋白 (Fc 標簽)
PSCA 前列腺干細胞抗原 0.5mgPSCA 前列腺干細胞抗原
COASY Protein Human 重組人 COASY / CoA synthase 蛋白
NA重組甲型流感 H3N2 神經酶 (Neuraminidase / NA) (E119V mutation) (高活性) Protein
EPHB6 Protein Human 重組人 EphB6 / EphB6 蛋白 (Fc 標簽)
NOG重組人 Noggin / NOG 蛋白 Protein
兔小腸隱窩上皮細胞大鼠基質金屬蛋白酶9(MMP9)試劑盒 ，英文名： MMP9 ELISA Kit
Mouse ansforming growth factor beta 1 (TGF- beta 1) ELISA Kit 小鼠轉化生長因子β1(TGF-β1)試劑盒
Ratα-glathioneS-ansferases,α-GSTELISAKit 大鼠αS轉移酶(α-GST)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforFAS/CD95ELISAKit大鼠凋亡相關因子
細胞甲戊二羥酸激酶(mevalonatekinase)活性比色法定量試劑盒20次
RatN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISAKit大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)試劑盒規格：96T/48T
原代細胞的培養條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
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