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操作步驟:

1）使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
2）根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3）加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
4）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
5）每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
7）每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
8）取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
9）在450nm波長處測定各孔的OD值。

試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關(guān)，我司嚴格按照進行，已獲得國家承認的“三證”，每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必擔(dān)心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風(fēng)濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類風(fēng)濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測抗原時，可用加入到標本稀釋液中使RF降解；
補體的控制方法：
①用EDTA稀釋標本；
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活；
2.外源性干擾因素：包括標本溶血、細菌污染、保存時間過長或凝固不全等；
控制方法：采血時規(guī)范操作，采集的血液勿用力震蕩，以防溶血；收集標本時采用無菌試管，經(jīng)檢測后再低溫凍存；保存時間不宜過久，檢測時盡量采用新鮮標本；對于凝固不全的血標本可適當(dāng)加入抗凝劑，并放入37℃水中1 h，待充分凝固后再離心分離血清。

具有如下優(yōu)點：
一、高效、靈敏、特異的抗體；
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型；
五、性價比非常好，節(jié)省實驗經(jīng)費。

子宮內(nèi)膜抗體

咪唑Mebendazole保存：-20℃規(guī)格：50mg

富含亮氨重復(fù)蛋白SHOC2抗體

氨蝶呤Methotrexate保存：-20℃規(guī)格：100mg

離子轉(zhuǎn)運蛋白3抗體

10％A晶型咪唑10%A crystaltype ofmebendazole保存：-20℃規(guī)格：50mg

細胞分化蛋白SEPT14抗體

過酰Benzoylperoxide保存：-20℃規(guī)格：100mg

鈣結(jié)合線粒體載體蛋白抗體

格列本脲Glibenclamide保存：-20℃規(guī)格：50mg

鈉離子肌醇轉(zhuǎn)運蛋白抗體

酚磺Etamsylate保存：-20℃規(guī)格：100mg

肌萎縮側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白4抗體

奮乃靜FenNaijing保存：-20℃規(guī)格：100mg

胞漿蛋白SH3GL3抗體

對羥基酰P-hydroxyphenyl acetamide保存：-20℃規(guī)格：50mg
8-epi-PGF2α elisa試劑盒ENANTHOYLOXY-5a-ANDROST-1-EN-17-ONE, 3b-(P)度：98%Gelsolin  凝溶膠蛋白抗原

ECHINACEA PURPUREA STANDARDS KIT(P)度：≥98% Gentamicin/BSA  慶大霉素偶聯(lián)牛血清白蛋白

ECHINACEA PURPUREA STANDARDS KIT(P)度：≥98% Gentamicin/FITC  熒光素標記慶大霉素

D-樟腦 CAMPHOR, (+)-(SG)度：≥98% Gentamicin/OVA  慶大霉素偶聯(lián)雞卵白蛋白

D-香茅醇 CITRONELLOL, D-(SG)度：≥98% GFAP(Glial Fibrillary Acidic Protein

D-精氨 ARGININE, D-(RG)度：≥98% GFP  綠色熒光蛋白

D-精氨 ARGININE, D-(RG)度：≥98% GFP  綠色熒光蛋白

D-氨 ALANINE, D-(RG)度：98%GFP  綠色熒光蛋白

阿米卡星英文名稱：Amikacin保存：20℃，避光規(guī)格：100mg

利福SV英文名稱：Rifamycin SV保存：20℃，避光規(guī)格：200mg

黏英文名稱：Colistin保存：20℃，避光規(guī)格：200mg

慶大英文名稱：Gentamicin保存：20℃，避光規(guī)格：200mg

桿菌肽英文名稱：Bacitracin保存：20℃，避光規(guī)格：100mg

卡那英文名稱：Kanamycin保存：20℃，避光規(guī)格：200mg

新英文名稱：Neomycin保存：20℃，避光規(guī)格：200mg

鏈英文名稱：Streptomycin保存：20℃，避光規(guī)格：200mg

紅英文名稱：Erythromycin保存：20℃，避光規(guī)格：200mg

四環(huán)素英文名稱：Tetracycline保存：20℃，避光規(guī)格：200mg

土英文名稱：Oxytetracycline保存：20℃，避光規(guī)格：200mg

環(huán)英文名稱：Cyclohexane保存：20℃，避光規(guī)格：1ml

二亞砜英文名稱：Two methyl sulfoxide保存：20℃，避光規(guī)格：1ml

英文名稱：Pyridine保存：20℃，避光規(guī)格：1ml

英文名稱：Benzene保存：20℃，避光規(guī)格：1ml

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
 2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴 
1.加標本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當(dāng)時，即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌 
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板 
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結(jié)果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。