化工儀器網
詳細介紹
產品簡介
發根農桿菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)農桿菌屬(agrobacterium)的一種革蘭氏陰性土壤細菌，它能夠
感染大多數雙子葉植物和少數單子葉植物以及個別裸子植物。C58C1 發根農桿菌菌株含有 pRiA4b
農桿堿型 Ri 質粒，具有廣泛的宿主范圍（薔薇科，夾竹桃科，豆科，茄科，黃芩，煙草等），同
時具有鏈m素，利f平抗性。本公司生產的 C58C1 化學轉化感受態細胞經特殊工藝制作，
pCAMBIA2301 質粒（卡那m素抗性）檢測，轉化效率≥ 104 cfu/μg DNA。
產品組成
組分
C58C1
化學感受態細胞
10 ×100 μL
100 ×100μL
定制
基因型：Agrobacterium rhizogenes (StrR ,RifR ) pRiA4b (agropine type)
存儲條件
-80 ℃保存; 請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
除農桿堿型 Ri 質粒 pRiA4b 外，無外源質粒 DNA 殘留
化學法轉化效率≥104 cfu/μg DNA。
使用方法
1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出，在手心融化成冰水混合物，置于冰水浴中；
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態細胞中，用手撥管底混勻，依次于冰上靜置 10 分鐘、液氮 5 分
鐘（或干冰乙醇浴和-80℃冰凍）、37 ℃水浴 5 分鐘、冰浴 5 分鐘；
3.加入 900 μl 無抗生素的 YEB 液體培養基，于 28℃振蕩培養 2~3 小時；
4. 6000 rpm 離心一分鐘收菌，留取 100 μl 左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應抗生素的 YEB 平板
上，倒置放于 28 ℃培養箱培養 2-3 天。
注意事項
1. 感受態細胞冰浴中解凍后應立即使用；
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/10；
3.C58C1 具有鏈m素、利f平抗性，不可用于具有鏈m素抗性或利f平抗性質粒的轉化。
化工儀器網