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詳細介紹
產品簡介
MG1655(DE3)菌株來源于 W1485，是 K12 的衍生菌株，是一種經過較少改造、比較接近于“野生型"
的大腸桿菌工程菌株。MG1655(DE3)外觀形態標準，既可做為擴增大腸桿菌野生型基因的模板使
用，也可作為蛋白表達的宿主菌株使用；T7 RNA 聚合酶位于 λ 噬菌體 DE3 區，該區域被整合于
MG1655 的染色體上，該菌株不含核酸酶 endA1 突變。經 pUC18 質粒轉化檢測，MG1655(DE3)感
受態細胞的轉化效率可達 108 cfu/μg DNA。
產品組成
組分
MG1655(DE3)
化學感受態細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：K12 F- λ- ilvG- rfb-50 rph-1 (DE3)
存儲條件
-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留；
化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養基（室溫或 37 ℃預熱），后置于 37 ℃搖床復壯 45 min；
5. 取不同體積的轉化產物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養箱培養過夜。
注意事項
1. 感受態細胞冰水浴中解凍后應立即使用；
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/10；
3. 加入待轉化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態細胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保優良轉化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。
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