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Mach1 T1感受態

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  • 型號 CC96106
  • 品牌 其他品牌
  • 廠商性質 生產商
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更新時間:2024-11-04 15:35:37瀏覽次數:100

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產品簡介

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大腸桿菌 Mach1 T1 菌株由野生型 E. coli W 菌株改造而來,是目前生長速度較快的感受態細胞之一,
在平板上 培養 8 h 可見克?。辉摼笔Я撕怂醿惹忻福╡ndA),提高了質粒 DNA 的產量和質量;
重組酶缺陷型(recA1398)減少插入片段的同源重組概率,保證了插入外源 DNA 的穩定性;菌株
攜帶 lacZΔM15 突變,故可用于藍、白斑篩選;tonA 突變賦予 Mach1

詳細介紹

產品簡介
大腸桿菌 Mach1 T1 菌株由野生型 E. coli 菌株改造而來,是目前生長速度較快的感受態細胞之一,
在平板上 培養 8 h 可見克隆;該菌缺失了核酸內切酶(endA),提高了質粒 DNA 的產量和質量;
重組酶缺陷型(recA1398)減少插入片段的同源重組概率,保證了插入外源 DNA 的穩定性;菌株
攜帶 lacZΔM15 突變,故可用于藍、白斑篩選;tonA 突變賦予 Mach1 T1 菌株對噬菌體 T1 和 T5 
抗性。經 pUC18 質粒轉化檢測,Mach1 T1 感受態細胞的轉化效率可達 10cfu/μg DNA。
產品組成
組分
Mach1 T1
感受態細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:Fφ80(lacZ)ΔM15 ΔlacX74 hsdR (rK- mK+) ΔrecA1398 endA1 tonA
存儲條件
-80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留;
化學法轉化效率≥10cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90 s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入900 μL LBSOC培養基(室溫或37 ℃預熱)然后置于37 ℃搖床復壯45 min;
5. 取不同體積的轉化產物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養箱培養過夜。
注意事項
1. 感受態細胞冰浴中解凍后應立即使用;
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/10;
3. 加入待轉化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態細胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保優良轉化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。


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