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詳細介紹
產品簡介
大腸桿菌 JM110 菌株具有硫酸鏈m素抗性(StrR)；是甲基化基因 dam、dcm 缺失的菌株，從該菌株
中提取得到的質粒 DNA，可被對 dam 和 dcm 甲基化敏感的內切酶切割；該菌株攜帶的
lacIq lacZΔM15 突變使其可以進行藍白斑篩選。但由于該菌株的轉化效率不太高，一般不用于質粒
構建的宿主，而是用于質粒轉化以便進行質粒去甲基化。經 pUC18 質粒轉化檢測，JM110 感受態
細胞的轉化效率可達 107 cfu/μg DNA 以上。
產品組成
組分
JM110
化學感受態細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：rpsL (StrR) thr leu thi-1 lacY galK galT ara tonA tsx dam dcm supE44 Δ(lac-proAB) /F′ [traD36
proAB lacIq lacZΔM15]
存儲條件
-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留；
化學法轉化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90s 后，立刻置于冰浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養基（室溫或 37 ℃預熱），后置于 37 ℃搖床復壯 45 min；
5. 取不同體積的轉化產物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養箱培養過夜。
注意事項
1. 感受態細胞冰浴中解凍后應立即使用；
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/10；
3. 加入待轉化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態細胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保優良轉化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。
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