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調試好視頻測量顯微鏡才能得更精準的數據
視頻測量顯微鏡被稱為“視頻"，因為它將傳統的顯微鏡與攝像系統、顯微鏡或計算機相結合，這使得顯微鏡的觀察結果能夠以數據的形式長期存儲。今天的顯微鏡非常強大。它的智能化、人性化和可擴展性使視頻測量顯微鏡非常受歡迎。那么視頻測量顯微鏡應該如何調試呢？讓我們來看看。
1、在正式試驗過程中，應分別采用陽性對照和陰性對照控制試驗條件，并將試驗樣品一式兩份，以確保試驗結果的準確性。有時背景較高，表明存在非特異性反應，可以用羊血清、兔血清或BSA阻斷。
2.在ELISA中，各種實驗條件的選擇非常重要，包括：
①固體載體的選擇：許多物質可用作固體載體，如PVC、聚苯乙烯、聚丙烯酰胺和纖維素。形式可以是凹板、試管、珠等，目前常用的是40孔聚苯乙烯凹板。無論是哪種載體，都可以在使用前進行篩選：用相同量的抗原包被，在相同的實驗條件下反應，觀察其顏色反應是否均勻，判斷其吸附性能是否良好。
②涂層抗體（或抗原）的選擇：當抗體（或抗體）吸附在固體載體表面時，要求純度良好，PH值通常要求在9.0至9.6之間。吸附溫度、時間和蛋白質含量也有一定影響，一般為4℃18-24小時。需要滴定蛋白質涂層的適當濃度：不同的蛋白質濃度（0.1、1.0和10μG/ml等），在其他測試條件相同的情況下觀察陽性樣品的OD值。選擇OD值高、蛋白質含量低的濃度。大多數蛋白質通常為1～10μg/ml。
③酶標抗體工作濃度的選擇：首先，用直接ELISA滴定初始滴度（見酶標抗體部分）。然后固定其他條件或使用“方陣法"（涂層的不同稀釋度、待測樣品的參考物和酶標記抗體）在正式實驗系統中準確滴定其工作濃度。
④酶底物和供氫體的選擇：供氫體選擇的要求便宜、安全、顯色反應明顯，但無色。一些氫供體（如OPD等）具有潛在的致癌作用，應予以保護。合格者應使用非致癌和敏感的氫供體，如TMB和ABTS，這些供體目前相對令人滿意。底物作用一段時間后，應加入強酸或強堿終止反應。通常，基材作用時間為10-30分鐘。