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N10000-病毒包裝/慢病毒構建
  • N10000-病毒包裝/慢病毒構建
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貨物所在地:上海上海

地: 上海

更新時間:2025-05-08 21:00:08

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慢病毒( Lentivirus )載體,這是以 HIV-1 (人類免疫缺陷 I 型病毒)為基礎發展起來的基因治療載體,對分裂細胞和非分裂細胞均具有感染能力。目前被廣泛地應用于表達RNAi的研究中

慢病毒( Lentivirus )載體,這是以 HIV-1 (人類免疫缺陷 I 型病毒)為基礎發展起來的基因治療載體,對分裂細胞和非分裂細胞均具有感染能力。目前被廣泛地應用于表達RNAi的研究中。

由于有些類型細胞脂質體轉染效果差,轉移到細胞內的siRNA半衰期短,通常體外合成 siRNA 對基因表達的抑制作用通常是3~5天,因而使其應用受到較大的限制。

然而,通過慢病毒包裝能夠產生表達shRNA的高滴度的慢病毒,在周期性和非周期性細胞、干細胞、受精卵以及分化的后代細胞中表達 shRNA,實現在多種類型的細胞和轉基因小鼠中特異而穩定的基因表達的功能性沉默,為在原代的人和動物細胞組織中快速而高效地研究基因功能,以及產生特定基因表達降低的動物提供了可能性

 

慢病毒包裝原理

慢病毒表達載體包含了包裝、轉染、穩定整合所需要的遺傳信息。慢病毒包裝質粒可提供所有的轉錄并包裝shRNA到重組的假病毒載體所需要的所有輔助蛋白。為產生高滴度的病毒顆粒,需要利用表達載體和包裝質粒同時共轉染細胞,在細胞中進行病毒的包裝,包裝好的假病毒顆粒分泌到細胞外的培養基中,離心取得上清液后,可以直接用于宿主細胞的感染,目的基因進入到宿主細胞之后,經過反轉錄,整合到基因組,從而高水平的表達效應分子

 

 

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