產(chǎn)品分類(lèi)品牌分類(lèi)

血清系列: SERANA胎牛血清低內(nèi)毒素膠原蛋白 ZETA LIFE胎牛血清

細(xì)胞轉(zhuǎn)染: 活體轉(zhuǎn)染試劑 LIPO3000轉(zhuǎn)染試劑高效轉(zhuǎn)染試劑

支原體清除: 支原體去除試劑

細(xì)胞凍存: 無(wú)血清細(xì)胞凍存液

實(shí)驗(yàn)耗材: 多功能開(kāi)關(guān)器封板膜 PCR & qPCR 孔板 qPCR耗材 PCR耗材

分子試劑: RNA提取等溫?cái)U(kuò)增克隆突變 PCR系列核酸提取純化核酸染料

細(xì)胞增殖與凋亡: 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)

Biozellen系列: 鼠尾膠原蛋白 3D基質(zhì)膠

培養(yǎng)基: 內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基細(xì)胞添加劑無(wú)血清培養(yǎng)基

ELISA試劑盒: 豬ELISA試劑盒小鼠ELISA試劑盒

TOYOBO（東洋紡）: PCR相關(guān)試劑

ZYMO RESEARCH: 試劑盒

Greiner（格瑞納）: 細(xì)胞培養(yǎng)小室

IKA（艾卡）: 刀頭

化學(xué)發(fā)光底物（ECL）: ECL化學(xué)發(fā)光液

PROSPEC系列: 單胺氧化酶

Epigentek系列: 細(xì)胞分析試劑盒

微生物檢測(cè): 生化鑒定試劑盒

細(xì)胞生物學(xué): 細(xì)胞輔助試劑細(xì)胞檢測(cè)試劑

Corning康寧: 凍存管嵌套/小室

解離試劑: 胰蛋白酶

細(xì)胞類(lèi)-實(shí)驗(yàn)耗材: 細(xì)胞培養(yǎng)瓶細(xì)胞培養(yǎng)皿細(xì)胞培養(yǎng)板

原代細(xì)胞: 小鼠原代細(xì)胞

植物檢測(cè)系列試劑盒: 植物激素系列植物氧化與抗氧化系列植物氮代謝系列植物脂肪酸代謝系列植物固氮作用系列植物呼吸作用系列植物光合作用檢測(cè)試劑盒

SERANA: BSA

細(xì)胞系: 人源細(xì)胞系

生化試劑盒

環(huán)境檢測(cè)系列試劑盒（AKEN）: 土壤氧化還原酶系列

類(lèi)器官培養(yǎng): 培養(yǎng)試劑盒

緩沖器和解決方案: 抗生素培養(yǎng)添加物隱窩增強(qiáng)劑保護(hù)液洗滌液凍存液解離液

生物三凝膠基質(zhì): 細(xì)胞外基質(zhì)

細(xì)胞因子分子: 抑制劑激動(dòng)劑

生物樣本庫(kù): 類(lèi)器官

蛋白研究系列: 蛋白緩沖 ALP發(fā)光液 ECL系列轉(zhuǎn)印膜轉(zhuǎn)膜封閉 PAGE凝膠試劑盒蛋白電泳蛋白制備免疫檢測(cè)

修飾檢測(cè)試劑盒: 蛋白修飾檢測(cè)試劑盒

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報(bào)告基因：β-半乳糖苷酶的原位染色實(shí)驗(yàn)方法

時(shí)間：2021/11/5閱讀：2132

材料與儀器

β-gal表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞
D-PBSA 染色液
6 孔培養(yǎng)板恒溫箱倒置顯微鏡

實(shí)驗(yàn)步驟

一、材料
非消毒物品

1. D-PBSA

2. 底物：X-gal（nvitrogen），以二甲基甲酰胺配成 20 mg/mL，用多聚丙烯管-20℃ 避光保存，最長(zhǎng)可達(dá) 6 個(gè)月

3. 固定液：1.8% 的甲醛和 0.05% 戊二醛，均以 PBSA 液配制；將 85 mL 水、10 mL 的 10x D-PBSA、5 mL 福爾馬林（37% 甲醛溶液）及 0.2 mL 戊二醛（25% 溶液）混合，制備成固定液，于 4℃ 儲(chǔ)存

4. 染色液：含 5 mmol/L 鐵氰鉀，5 mmol/L 亞鐵氰鉀，2 mmol/LMgCl2，以 D-PBSA 配制，4℃ 儲(chǔ)存

5. 底物/染色液：1 mg/mLX-gal，以染色液配制，現(xiàn)用現(xiàn)配

6. 含 10% 甲醛的 D-PBSA 液

7. 將β-gal 的表達(dá)質(zhì)粒作為報(bào)告基因轉(zhuǎn)染（如：pcMV β-gal ）

二、操作步驟：
1. 用 2 mL D-PBSA 液洗滌細(xì)胞（如在 6 孔培養(yǎng)板上）。

2. 用 1 mL 固定液于室溫下固定細(xì)胞 5 min。

3. 用 2 mL D-PBSA 洗滌細(xì)胞 2 次。

4. 將 1 mL 底物/染色液加入到每個(gè)培養(yǎng)孔內(nèi)，37℃ 孵育 2 h。

5. 用 2 mL D-PBSA 液沖洗每孔細(xì)胞，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞，計(jì)數(shù)藍(lán)染（β-gal 陽(yáng)性）細(xì)胞。

6. 培養(yǎng)板的儲(chǔ)存。在每孔加 1 mL 含 10% 甲醛的緩沖鹽溶液，室溫下固定 10 min，然后用緩沖鹽溶液洗滌細(xì)胞，4℃ 儲(chǔ)存緩沖鹽溶液。

報(bào)告基因：β-半乳糖苷酶的原位染色實(shí)驗(yàn)方法

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