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凝膠凈化色譜的分離原理及其對載體的要求

閱讀:1897        發布時間:2022-9-6
凝膠色譜法又稱分子排阻色譜法,主要用于高聚物的相對分子質量分級分析以及相對分子質量分布測試。

凝膠凈化色譜是用溶劑作流動相,流經多孔填料(如多孔硅膠或多孔樹脂)作為分離介質的液相色譜法,是液相色譜的一個分支。凝膠凈化色譜儀是一款處理大分子物質以及高聚物的理想設備之一。
 
凝膠凈化的分離原理:
 
一個含有各種分子的樣品溶液緩慢地流經凝膠色譜柱時,各分子在柱內同時進行著兩種不同的運動:垂直向下的移動和無定向的擴散運動。
大分子物質由于直徑較大,不易進入凝膠顆粒的微孔,而只能分布顆粒之間,所以在洗脫時向下移動的速度較快。
小分子物質除了可在凝膠顆粒間隙中擴散外,還可以進入凝膠顆粒的微孔中,即進入凝膠相內,在向下移動的過程中,從一個凝膠內擴散到顆粒間隙后再進入另一凝膠顆粒,如此不斷地進入和擴散,小分子物質的下移速度落后于大分子物質,從而使樣品中分子大的先流出色譜柱,中等分子的后流出,分子最小的最后流出。
 
凝膠凈化色譜儀對載體的要求有哪些?
 
1、良好的化學穩定性和熱穩定性;
2、有一定的機械強度;
3、不易變形;
4、流動阻力小;
5、對試樣沒有吸附作用;
6、分離范圍越大越好(取決于孔徑分布)等;
7、載體的粒度愈小,愈均勻,堆積的愈緊密,色譜柱分離效率愈高。

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