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多肽分離色譜柱選擇注意事項(xiàng)

閱讀:1557      發(fā)布時(shí)間:2024-3-14
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  多肽分離色譜柱是生物化學(xué)、生物技術(shù)、藥物研究等領(lǐng)域中用于分離多肽的重要工具。這些色譜柱基于不同的分離原理設(shè)計(jì),以滿足各種多肽分離的需求。
 
  首先,根據(jù)多肽的性質(zhì)和分離目標(biāo),可以選擇不同類型的色譜柱。例如,反相色譜柱(RP柱)主要基于樣品與固定相之間的疏水相互作用進(jìn)行分離,適用于大多數(shù)多肽的分離。離子交換色譜柱(IEX柱)則基于帶電離子與固定相上的離子交換基團(tuán)之間的相互作用進(jìn)行分離,適用于特定pH值和離子特性的多肽。此外,尺寸排除色譜柱(SEC柱)根據(jù)分子大小的差異進(jìn)行分離,對(duì)分析或純化高分子量的多肽特別有用。
 
  在選擇多肽分離色譜柱時(shí),還需要考慮其他因素,如固定相的孔徑和比表面積。通常,固定相孔徑要大于樣品分子體積的三倍,但對(duì)于多肽類樣品分子而言,由于其分子結(jié)構(gòu)呈長鏈狀,孔徑的選擇不必嚴(yán)格遵循這一規(guī)律。同時(shí),比表面積的大小也會(huì)影響分離效果和上樣情況。一般來說,代表表面修飾的基團(tuán)越多,分離效果就越好,載樣量也越大。

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