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酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（enzyme linked immunosorbent assay，簡(jiǎn)寫ELISA或ELASA）指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體特異性結(jié)合進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測(cè)方法。酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）為免疫學(xué)中的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)，本詞條從定義、基本原理、分類方法、操作要點(diǎn)等方面對(duì)其進(jìn)行了詳細(xì)介紹。

中文名

酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定

外文名

enzyme linked immunosorbent assay

簡(jiǎn)寫

ELISA或ELASA

類型

概念

根據(jù)ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒)所用的固相載體而區(qū)分為三大類型：一是采用聚苯乙烯微量板為載體的ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒)，即我們通常所指的ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒)（微量板ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒)）；另一類是用硝酸纖維膜為載體的ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒),稱為斑點(diǎn)ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)

① 100μl AP2型工作量抗原包被 → 4℃過夜，洗滌三次、拋干

② 用200μl阻斷緩沖液進(jìn)行封閉 → 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干

③ 加工作量1:4稀釋被檢豬血清100μl → 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干

④ 加100μl工作量兔抗AP2型血清 → 37℃ 30分鐘，洗滌三次、拋干

⑤ 加100μl工作量豬抗兔IgG-HRP → 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干

⑥ 加100μl OPD底物液 → 37℃ 20分鐘，加終止液

⑦ 用ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒)檢測(cè)儀測(cè)定OD值