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酶聯(lián)免疫吸附測定（enzyme linked immunosorbent assay，簡寫ELISA或ELASA）指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體特異性結(jié)合進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測方法。酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）為免疫學(xué)中的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)，本詞條從定義、基本原理、分類方法、操作要點(diǎn)等方面對(duì)其進(jìn)行了詳細(xì)介紹。

中文名

酶聯(lián)免疫吸附劑測定

外文名

enzyme linked immunosorbent assay

簡寫

ELISA或ELASA

類型

概念

結(jié)合物的定量測定 一般是對(duì)結(jié)合物中的酶和IgG進(jìn)行定量測定。常用紫外分光光度計(jì)于403nm和280nm進(jìn)行測定，然后按下列公式計(jì)算：

酶量（mg/ml）=OD403×0.42

IgG量（mg/ml）=（OD280－OD403×0.4）×0.94×0.62

對(duì)于過碘酸鈉氧化法制備的標(biāo)記抗體量，按下列公式計(jì)算：

IgG量（mg/ml）=（OD280－OD403×0.34）×0.62

已知酶量和IgG量后，即可計(jì)算出標(biāo)記抗體的摩爾（mol）比值。

HRP/IgG摩爾比值=HRP（mg/ml）/IgG（mg/ml）×4

結(jié)合物中酶總量=HRP（mg/ml）×結(jié)合物溶液量

結(jié)合物產(chǎn)率=結(jié)合物中酶總量/標(biāo)記時(shí)加入的酶量×100%

用于ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒)的結(jié)合物的酶量為400(g/ml時(shí)效果一般，為500(g/ml時(shí)效果較好，達(dá) 1000(g/ml時(shí)成效很好。mol.比值由于結(jié)合物中含的IgG并不*可靠，所以不能作為主要參數(shù)。一般認(rèn)為mol.比值為0.7時(shí)效果一般，1.0時(shí)效果較好，1.5-2.0時(shí)最好。酶結(jié)合率為 7%時(shí)效果一般，為9%－10%較好，達(dá)30%以上時(shí)最好。