土壤有效硅試劑盒說明書
微量法100T/96S
注 意 ：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義：
硅元素是一種十分重要的植物營養(yǎng)元素，土壤中有效硅含量影響著植物的光合作用、呼吸作用以及對逆境的抗性。
測定原理：
硅酸根與鉬酸銨在弱酸條件下生成硅鉬酸，可被還原劑還原成硅鉬藍，在700nm有特征吸收峰。
自備實驗用品及儀器：
天平、常溫離心機、恒溫水浴鍋、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、震蕩儀。
試劑組成和配制：
提取液：液體105mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體4mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體4mL×1瓶，4℃保存。
試劑三：液體4mL×1瓶，4℃保存。
試劑四：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加入4mL試劑四溶劑充分溶解。
試劑四溶劑：液體4mL×1瓶，4℃保存。
樣本處理：
新鮮土樣風干，過20目篩，按照土壤質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5的比例（建議稱取約0.2g土樣，加入1mL提取液），振蕩提取1h，10000g ，25℃離心10min，取上清液待測。
測定操作表：
空白管 | 測定管 | |
樣本（μL） | 40 | |
提取液（μL） | 40 | |
試劑一（μL） | 40 | 40 |
混勻，35℃，15min | ||
試劑二（μL） | 40 | 40 |
混勻，25℃，10min | ||
試劑三（μL） | 40 | 40 |
試劑四（μL） | 40 | 40 |
充分混勻，25℃靜置30min | ||
于微量石英比色皿/96孔板，蒸餾水調(diào)零，測定700nm處吸光值A，分別記為A空白管和A測定管，△A=A測定管-A空白管 | ||
計算公式：
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準曲線：y = 0.0933x -0.0523，R2 = 0.9992
有效硅含量（mg/kg）=（△A+0.0523）÷ 0.0933×V反總÷（W×V樣÷V樣總）
= 53.6×（△A+0.0523）÷W
V反總：反應總體積，0.2mL；V樣：反應體系中加入樣本體積，0.04mL；V樣總：加入提取液體積，1mL，W：樣本質(zhì)量，g
b. 用96孔板測定的計算公式如下
標準曲線：y = 0.0467x -0.0523，R2 = 0.9992
有效硅含量（mg/kg）=（△A+0.0523）÷ 0.0467×V反總÷（W×V樣÷V樣總）
= 107.2×（△A+0.0523）÷W
V反總：反應總體積，0.2mL；V樣：反應體系中加入樣本體積，0.04mL；V樣總：加入提取液體積，1mL，W：樣本質(zhì)量，g
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