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DAB 染色試劑盒
簡介
二氨基聯苯胺（DAB）是辣根過氧化物酶最敏感、最常-用的顯色底物，反應產物為不溶
于水、二甲苯和醇的棕色沉淀物。本產品采用特殊配方，靈敏度高，背景低，儲存穩定，使用方便。適合于蛋白印跡、免疫組織化學和免疫細胞化學、斑點印跡和生物芯片等的染色和顯色反應。
包裝規格:
組分 | 規格 1 | 規格 2 |
DAB 顯色液 A（20×） | 0.5mL | 1mL |
DAB 顯色液 B（20×） | 0.5mL | 1mL |
用法：
1. 臨用前配制 10 mL 1×DAB 顯色工作液：將 0.5 mL 20× DAB 顯色液 A 加入 9 mL 1
×PBS 中并渦旋混勻。向 DAB / PBS 混合物中加入 0.5 mL 20×DAB 顯色液 B 渦旋混合均勻。 可以根據需要按比例縮放體積。 注意：不要使用含有疊氮-化鈉的緩沖液，疊氮-化鈉是一種 HRP 抑制劑。
2. 在樣品的最后一次洗滌完畢后，去除洗滌液，加入足夠 的 DAB 顯色工作液，確保能充分覆蓋樣品。室溫避光孵育 3-30 分鐘或更長時間，直至顯色達到預期深淺。免疫印跡實驗， 應保證樣品在一個足夠多的染色液中且能被自由晃動。
3. 去除 DAB 染色工作液，用 PBS 沖洗樣品幾次以中止顯色反應。對于用顯微鏡觀察的細胞或組織樣品，可復染樣品（可選）并安裝在水性封固介質中。或者，可以將樣品脫水并安裝在有機封固劑中。免疫印跡實驗，可將樣品用水沖洗，風干，然后在室溫下儲存。
DAB 染色試劑盒儲存與運輸：
-20℃避光密閉保存，一年有效。避免反復凍融。2~8℃運輸，在途時間 5 天對試劑無影響。
注意事項
1. DAB 對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內。
2. 顯色工作液應現用現配，新鮮配制的工作液應為無色或淺棕色，如顏色過深，請勿使用。
3. 顯色時間嚴格控制，根據情況調整，以免顯色過度。固相膜顯色數小時后即會褪色，不能永-久存在。
4. 請將沾有DAB 顯色液A 的容器等放在含有 3% KMnO4，2% NaHCO3 的溶液浸泡 3h， 以減少污染。
5. 本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品， 不得存放于普通住宅內。
6. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
常見問題與分析
1. 背景顯色太深。
a. 在免疫組化時如果背景顯色太深，一方面需考慮使用適當的封閉液進行封閉，例如選購適當的封閉液或使用和一抗相同來源的血清(10%)進行封閉。另一方面，請注意選購經過適當吸附的二抗，以減少二抗的非特異性吸附。
b. 在免疫組化時如果背景顯色太深，需注意滅活內源性過氧化氫酶。
c. 可以考慮縮短顯色時間，或降低二抗濃度。
d. 選擇適當強度的洗滌液，或延長洗滌時間。
2. 沒有顯色或顯色太弱。
a. 可以考慮適當提高一抗或二抗的濃度。檢測二抗效果，滴一滴稀釋二抗在膜上，檢測二抗是否可以被正常顯色。
b. 可以考慮使用更加靈敏的放大檢測體系，例如使用生物素檢測體系。
c. 可以適當延長顯色時間，另外確定抗原修復是否對于使用的一抗是必需的。
更多信息敬請詳詢！
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