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離子交換色譜對抗VEGFR2單抗的電荷異質(zhì)性分析
閱讀：1144 發(fā)布時(shí)間：2017-6-19
單克隆抗體有兩條重鏈兩條輕鏈組成，相對分子質(zhì)量高達(dá)150000左右，結(jié)構(gòu)復(fù)雜。在單抗制品的生產(chǎn)和儲(chǔ)存過程中會(huì)發(fā)生復(fù)雜的翻譯后修飾而導(dǎo)致巨大的異質(zhì)性，其中電荷異質(zhì)性對單抗的穩(wěn)定性及其生物學(xué)功能發(fā)揮具有重要的影響而成為關(guān)鍵質(zhì)量屬性，并且電荷異質(zhì)性可反映其生產(chǎn)工藝的穩(wěn)定性，所以受到生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)界及監(jiān)管機(jī)構(gòu)密切關(guān)注。
單抗C末端賴氨酸的不均一性、甲硫氨酸氧化、天冬氨酸轉(zhuǎn)變?yōu)槎《啺返瓤赡苁箚慰巩a(chǎn)生堿性變異體峰，其中C末端賴氨酸的不均一性zui為常見且有一定比例；N-糖末端的唾液酸化修飾、氨基酸殘基的脫酰胺等可使單抗產(chǎn)生酸性變異體峰，其中N-糖末端的唾液酸化修飾較常見，尤其對于鼠源性雜交瘤細(xì)胞系如NSO何SP2/2細(xì)胞所表達(dá)的單抗而言其比例一般較高。幾乎所有這些翻譯后修飾均可改變單抗的表面電荷分布特性，所以離子交換液相色譜可有效對單抗的電荷異質(zhì)性進(jìn)行分析。
研究利用離子交換搞笑液相色譜分析了一種VEGF2單抗的電荷異質(zhì)性，并結(jié)合羧肽酶B和N-糖酰胺酶F2種酶切對此抗體電荷異質(zhì)性形成的原因進(jìn)行了初步研究