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基于IEF的蛋白等電點分析檢測技術服務詳情介紹

dànbáizhì分子是兩性電解質，當調節溶液的酸堿度，使dànbáizhì分子上所帶的正負電荷相等時，在電場中，該dànbáizhì分子既不向正極移動，也不向負極移動，這時溶液的pH值，就是該dànbáizhì的等電點（isoelectric point, pI）。蛋白的等電點與其氨基酸序列和三維結構密切相關，特定蛋白的等電點是固定的，因此可以通過比較不同dànbáizhì的等電點來研究它們的結構和功能差異，jīngquè測定等電點是生物制品電荷異質性表征的重要一環。

等電聚焦（Isoelectric Focusing，IEF）是一種非常有效的dànbáizhì等電點分析技術。其利用等電點處的dànbáizhì電荷為零的特性，帶電的dànbáizhì在電泳中向極性相反的方向遷移，當到達其等電點（此處的pH值使相應的dànbáizhì不再帶電荷）時，電流達到zuì小，不再移動，從而達到檢測生物制品等電點的目的。百泰派克生物科技（BTP）通過CNAS/ISO9001雙重質量認證體系；公司根據IEF原理，建立了針對于不同類別生物制品的蛋白等電點檢測平臺，可實現對蛋白、抗體、疫苗、多肽、膠原蛋白等的等電點jīngquè測定。

實驗儀器

• GE公司的Ettan IPGphor 3

技術應用

基于cIEF的等電點分析，檢測器采集280nm處的吸收峰。對于280nm處無吸收峰的生物制品，例如膠原蛋白，cIEF的方法顯然不太合適。基于IEF的方法是對280nm處無吸收峰蛋白等電點檢測的有效補充，并在膠原蛋白類生物制品和醫療器械表征中得到廣泛應用。

案例示意

實驗過程中，一根膠條用來測試Marker，對預制膠條的pI分布情況進行校準，另外一根膠條用來測試樣品；兩個膠條同時進行等電聚焦以減少系統誤差。

左邊為pI marker結果，右邊為膠原蛋白樣品結果

典型問答

問題1：為什么多數dànbáizhì的等電點是中性偏酸性？

回答：dànbáizhì是由氨基酸組成的，而大多數氨基酸等電點小于人體的pH（pH=7.4），故而大多數的dànbáizhì的等電點偏酸性，如山羊wèi dàn bái méi等電點約為3。

問題2：有沒有等電點偏堿性的dànbáizhì？

回答：存在pI堿性的dànbáizhì。當dànbáizhì中的堿性氨基酸，如zǔānsuān，jīngānsuān、賴氨酸、比列較大，會導致等電點偏堿性，如yú jīng dàn bái等電點約為12。

問題3：做等電點檢測，兩種檢測方法如何選擇？

回答：基于CIEF的等電點檢測需要樣品具有280nm的紫外吸收；不具有280nm的紫外吸收的樣品（例如膠原蛋白）進行基于IEF的等電點檢測。

中/英文項目報告

在技術報告中，百泰派克會為您提供詳細的中英文雙語版技術報告，報告包括： 1. 實驗步驟（中英文） 2. 相關的實驗參數（中英文） 3. 基于IEF的蛋白等電點分析詳細信息 4. 電泳圖片 5. 原始數據

基于IEF的蛋白等電點分析一站式服務

您只需下單-寄送樣品 百泰派克一站式服務完成：樣品處理-上機分析-數據分析-項目報告

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統對dànbáizhì序列進行分析，提供基于質譜的蛋白測序分析服務，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務，對蛋白序列進行分析。

※服務優勢：

1.采用目前世界上優良的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務，助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫學及高通量修飾組學等研究工作。

※服務優勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規模實驗分析，發現新的生物標記物;

2.體內體外多種dànbáizhì標記方法，適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質譜分析靈敏度高，實驗結果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析，分析更系統準確。

三、單細胞質譜流式技術分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統進行單細胞質譜流式技術分析，采用金屬元素標記物（通常是金屬元素標記的特異抗體）標記細胞表面和內部的分子，然后用流式細胞原理分離單個細胞，再用電感耦合等離子體質譜（ICP-MS）分析單個細胞的原子質量譜，zuì后將原子質量譜數據轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。

※服務優勢：

1.技術優良，*技術空白

采用金屬標記抗體技術，避免了傳統流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數量大，成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細胞匯總的分析數目一般在2x10^4個左右，而流式質譜技術一次（單樣本）就可分析至少10^5的細胞，實現了數量級的提高，且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應用前景大

①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規蛋白外，質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現

百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析，可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質譜技術，MALDI TOF，高效色譜分離技術，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析，到產品變異性和純度分析。旨在提供優質生物藥物分析服務，幫助生物醫藥生產商提高生物藥物品質。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質譜多組學優質服務商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫療器械行業提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規和指導原則，通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證，建立了完備的質量體系，數據冷熱/異地備份，設備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術服務，支持新藥研發、藥物申報注冊和生產放行。

1.公司采用ISO9001質量控制體系，zhuānyè提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務；

2.獲國家CNAS實驗室認可，為客戶提供符合全球藥政法規的藥物質量研究服務；

3.業務范圍覆蓋dànbáizhì組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等；

4.七大質量控制檢測平臺，滿足您一站式服務需求；

5.服務3000+企業，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優質的生物質譜分析服務!

基于IEF的蛋白等電點分析檢測技術服務詳情介紹