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毛細管離子色譜質譜聯(lián)用測定藍藻發(fā)酵液中的糖

閱讀:948      發(fā)布時間:2016-04-29
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毛細管離子色譜質譜聯(lián)用測定藍藻發(fā)酵液中的糖

賽默飛近日發(fā)布藍藻發(fā)酵液中糖的檢測方案。藍藻可以進行光合作用,與高等植物葉綠素具有一定程度上的同源性,加上其研究體系簡單,長期以來一直是研究光合作用的模式生物。除此之外,藍藻還可以進行固氮作用,將大氣中的氮氣經固氮作用轉化為可以利用的氮源,用于提高土壤的肥力。如果可以通過代謝工程改造藍細菌生產蔗糖并提供給大腸桿菌等微生物發(fā)酵生產生物燃料,必將加速整個生物燃料的產業(yè)化進程,具有顯著的意義。

賽默飛發(fā)布的藍藻發(fā)酵液中糖的檢測方案,采用 Thermo ScientificTMDionexTMICS-4000 毛細管 HPICTM系統(tǒng)和質譜聯(lián)用法測定發(fā)酵液中的一些成分,分離測定7種糖,如蔗糖、乳糖、葡萄糖、海藻糖、葡萄糖甘油酯、甘露糖、果糖等。毛細管離子色譜常用色譜柱直徑為0.4 mm,流速為10 μL/min,其進樣體積通常為0.4 μL,與常規(guī)分析型離子色譜相比,其靈敏度是常規(guī)離子色譜的近百倍。毛細管離子色譜的流速是10 μL/min,符合質譜對低流速的需求。本方法在柱后乙腈溶液中添加了少量乙酸鈉,以提高糖在質譜中的重現(xiàn)性。此方法的建立有利于了解其基因改造效果,對于充分利用藍藻意義重大。毛細管離子色譜質譜聯(lián)用測定糖方法操作簡便,重復性好,線性范圍內相關性好,準確度高,進一步拓展了毛細管離子色譜的應用范圍,具有較高的實用價值。

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