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phi29 DNA Polymerase來源于嗜熱脂肪芽孢桿菌（Bacillus subtilis）的噬菌體phi29，在大腸桿菌（Escherichia coli）中重組表達純化得到，具有很強的鏈置換活性，高效的持續合成能力以及高保真度等特點。其模板為環狀單鏈DNA或雙鏈DNA；此外，其對分子量較大的線性模板（如基因組DNA）同樣可以持續合成，但是擴增效果不如環狀模板。