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服務介紹:
細胞增殖是生物體的重要生命特征,細胞以分裂的方式進行增殖,是生物體生長、發(fā)育、繁殖和遺傳的基礎。細胞增值檢測有PI、Ki67、MTT和CCK-8等多種方法,里來生物為您提供細胞增殖實驗服務。
MTT 比色法,是一種檢測細胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結(jié)晶甲瓚(Formazan)并沉積在細胞中,而死細胞無此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細胞中的甲瓚,用酶聯(lián)免疫檢測儀在492nm波長處測定其光吸收光值,可間接反映活細胞數(shù)量。
服務項目 | 規(guī)格 | 價格 |
---|---|---|
MTT檢測 | 元/板 | ¥500.00 |
備注:不含細胞株和受檢藥物。4個復孔(共60孔可以用,但要除去調(diào)零組、對照組,即藥物組最多可設置13組),實驗數(shù)據(jù)分析,出具簽字蓋章實驗報告。
操作流程:
① 收集對數(shù)期細胞,調(diào)整細胞懸液濃度3×104~5×104個/mL;
② 96孔加入細胞懸液,100 μl/孔,邊緣用PBS填充,5% CO2、37℃孵育;
③ 培養(yǎng)24 h后給藥,設置3~6個復孔,5% CO2、37℃孵育;
④ 孵育適當時間后,棄舊液,用無血清培養(yǎng)基與CCK8按照10:1稀釋200 μl/孔/無血清培養(yǎng)基與MTT按照9:1稀釋,200 μl/孔,繼續(xù)培養(yǎng)至所需時間點;
⑤ MTT:時間到后,小心吸去孔內(nèi)培養(yǎng)液,每孔加入150 μl二甲基亞砜,置搖床上低速振蕩10 min,使結(jié)晶物充分溶解,在酶標儀570 nm處檢測各孔的吸光值。
客戶提供:
(1)足量樣品、樣品信息(如細胞類型、分子量、溶解性、穩(wěn)定性、保存條件等);
(2)相關(guān)實驗設計內(nèi)容(如樣品作用時間、濃度等)、細胞株等。
細胞常見的運輸方式:
凍存管形式的細胞:液氮或者干冰條件下運輸。
培養(yǎng)瓶形式的細胞:要求用無膜培養(yǎng)瓶培養(yǎng),瓶帽旋緊并且用封口膜封口,常溫運輸。
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