淀粉含量檢測試劑盒

注意：正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定。

產(chǎn)品內(nèi)容：

試劑一：液體 50mL×1 瓶，4℃保存； 試劑二：液體 20mL×1 瓶，4℃保存； 試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存；

標準品：粉劑×10mg支，4℃保存；臨用前加入 1mL 蒸餾水溶解，制備 10mg/mL 葡萄糖標準液。

產(chǎn)品說明：

淀粉是植物中糖的主要儲存形式，其含量測定對于評價食品營養(yǎng)價值和調(diào)查植物體內(nèi)糖代謝都有重要意義。

利用 80％乙醇可以把樣品中可溶性糖與淀粉分開，進一步采用酸水解法分解淀粉為葡萄糖，采用蒽酮比色法測定葡萄糖含量，即可計算淀粉含量。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計、水浴鍋、可調(diào)式移液器、玻璃比色皿、研缽、冰、濃硫酸（不允許快遞）、蒸餾水。

操作步驟：

一、淀粉提取：

1、稱取約 0.1g 樣品于研缽中研碎，加入 1mL 試劑一，充分勻漿后轉(zhuǎn)移到 EP 管中，80℃水浴提取

30min，3000g，常溫離心 5min，棄上清，留沉淀。

2、沉淀中加入 0.5mL 雙蒸水，放入沸水浴中糊化 15min（蓋緊，以防止水分散失）。

3、冷卻后，加入 0.35mL 試劑二，常溫提取 15min，振蕩 3-5 次。

4、加入 0.85mL 雙蒸水，混勻，3000g，常溫離心 10min，取上清液。

5、取上清液 100μL 加入 700μL 蒸餾水后即進行了八倍稀釋測定。注：若稀釋八倍后樣品吸光度大于 1.5 或小于 0.1，建議將樣品再進行適當稀釋或濃縮后測量。

標準溶液準備：

將 10mg/mL 葡萄糖標準液進行二倍稀釋得到 0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625、0.003125、0.00156mg/mL 標準溶液備用。

二、測定操作表：

1、分光光度計預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 620nm，蒸餾水調(diào)零。

2、調(diào)節(jié)水浴鍋至 95℃。

3、工作液的配制：臨用前在試劑三中加入 13.5mL 蒸餾水后，緩慢加入 76.5mL 濃硫酸，不斷攪拌， 充分溶解，待用。

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4、標準品測定：取 0.2mL 標準溶液（蒸餾水做空白）和 1mL 工作液至 EP 管中，95℃水浴 10 min

（蓋緊，防止水分散失），自然冷卻至室溫，在 620 nm 波長下測定吸光度值 A 標準及 A 空白。計算ΔA=A 標準-A 空白。

5、樣本測定：取0.2mL樣本和1mL工作液至EP管中，95℃水浴10 min（蓋緊，防止水分散失），自然冷卻至室溫，在620 nm 波長下測定吸光度值A測定。ΔA′=A測定- A空白。

三、淀粉含量計算：

1、標準曲線繪制：

以 0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625、0.003125、0.00156mg/mL 葡萄糖標準溶液為橫坐標，ΔA 為縱坐標繪制標準曲線，得到線性回歸方程 y=kx+b，將ΔA′代入方程得到 x（mg/mL）； 2、淀粉含量計算：

（1）、按照蛋白濃度計算

淀粉含量(mg/mg prot)=x×稀釋倍數(shù)×V 提取÷（Cpr×V 提取）=8x÷Cpr 2、按樣本鮮重計算

淀粉含量(mg/g 鮮重)=x×稀釋倍數(shù)×V 提取÷W=13.6x÷W

V 提取：提取后體積，1.7 mL；Cpr：樣本提取后蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣品質(zhì)量，g；稀釋倍數(shù)：8。

注意事項：由于工作液具有強腐蝕性，請謹慎操作。

上海語純生物科技有限公司，是由具有*生命科學(xué)、生物技術(shù)背景人員共同創(chuàng)辦的技術(shù)企業(yè)。公司專注于原代細胞、腫瘤細胞及細胞培養(yǎng)相關(guān)試劑產(chǎn)品，為高校、食品、醫(yī)藥、生物研究等領(lǐng)域提供相關(guān)技術(shù)支持和服務(wù)。

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注意事項

1、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套及口罩操作；

2、為保持本產(chǎn)品的優(yōu)良使用效果，請務(wù)必按照建議的儲存條件進行保存；

3、本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進一步生產(chǎn)使用，不可用于臨床診斷或治療。

淀粉含量檢測試劑盒