PAGE凝膠銀染試劑盒 凝膠染色

NobleRyder  G5098  PAGE凝膠銀染試劑盒,蛋白銀染試劑盒 蛋白快速銀染試劑盒,PAGE Gel Silver Staining Kit

產品貨號：G5098

產品名稱：PAGE凝膠銀染試劑盒,蛋白銀染試劑盒 蛋白快速銀染試劑盒,PAGE Gel Silver Staining Kit

產品規格：1L

產品簡介：

別名：蛋白銀染試劑盒 蛋白快速銀染試劑盒

英文名稱：PAGE Gel Silver Staining Kit

中文名稱：PAGE凝膠銀染試劑盒

規格：1L

儲存條件：RT，avoid light，1 year

具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準

產品介紹

 蛋白質條帶的銀染是基于蛋白質中各種基團（如琉基、碳基等）與銀的結合，然后用還原劑如甲醛在堿性環境下使Ag+還原成銀顆粒，可把蛋白電泳帶染成黑褐色。它主要用于聚丙烯酰胺凝膠電泳染色。其靈敏度比考馬斯亮藍高，該產品整個過程操作簡單，靈敏度高，能檢測到10ng以下的蛋白條帶。

操作步驟（僅供參考）:

一、      染色液配制(無水乙醇自備)

需要配制的染色液體積根據 PAGE 膠的大小而定，一般的 mini-PAGE 膠需要 20-30mL。配制用 的器皿清洗干凈后用去離子水涮洗，染色液須用去離子水配制，現用現配。如果配制的溶液體積不 是 100mL，可以按比例改變各成分用量。

1. 固定液：取 40mL 無水乙醇，10mL 染色液 A 加去離子水至 100mL，混勻；

2. 敏化液： 取 30mL 無水乙醇，10mL 染色液 C 加去離子水至 100mL，混勻；

3. 銀染液：稱取 0.12g 試劑 E，用 50mL 去離子水溶解，加入 10ul 染色液 B 混勻，加去離子水 至 100mL 現用現配。

4. 顯色液：10mL 顯色液 D 和 30μL 染色液 B 加入去離子水至 100mL，混勻，現用現配。

5. 終止液：取 5mL 染色液 A 加去離子水稀釋至 100mL，現用現配。

二、染色：

1. PAGE 電泳結束后，將 PAGE 蛋白膠轉移至玻璃平皿或搪瓷盤中，用固定液固定 30min。

2. 將 PAGE 膠轉移至敏化液中，使染液沒過 PAGE 膠，室溫作用 30min?？芍糜趽u床上緩慢搖晃

3. 棄去敏化液，用去離子水漂洗三次，每次 10min。

4. 將 PAGE 膠轉移至銀染液中，使染液沒過 PAGE 膠，室溫搖晃 40min。

5. 將 PAGE 膠轉移至顯色液中，使顯色液沒過 PAGE 膠，室溫搖晃，該顯色一般在 10min右。

6. 再選擇合適的時間進行終止，棄去顯色液，加入終止液即可。最后可進行信號收集保存。

注意事項：

1. 銀染主要出現在 PAGE 膠的表面，使用薄膠（0.5-0.75mm）可以提高靈敏度。

2. 對于考馬斯亮藍染色的 SDS-PAGE 膠，可用甲醇將膠漂洗后，繼續進行銀染?？既具^程中 的乙酸會干擾銀染，因此要確保將 PAGE 凝膠中殘留的乙酸che底洗凈。

3. 不同蛋白質對銀染的反應是不一樣的，尤其是堿性蛋白染色效果差。因此，不宜用銀染測 定不同蛋白的比例。

4. 染色過程中，緩慢的振蕩是必要的，一般選擇 40-60 rpm.

5. 凝膠表面的裂紋多是由于壓力、手印及表面干燥所致，所以全程中都應帶手套操作。

6. PAGE 凝膠背景呈均一的黑色多是水中的雜質引起的，所以溶液的配制應使用電導率小于 1 μS 的去離子水。

7. 如果染色后有呈灰塵或煙霧狀灰色或棕色的沉淀出現在凝膠表面，可能是在幾步漂洗過程 中洗得不夠che底，或是染色過程時溫度太低。

8. 較深的銀染背景多是丙烯酰胺中的雜質所致。

9. PAGE 膠中的甘油、尿素、gan氨酸、Triton X-100 和兩性電解質這些物質會干擾銀染。

10. 室溫操作時，溫度的波動往往會干擾銀染的效果，恒溫水浴可以解決這個問題。

11. 憑借戊二醛預處理可以使各種蛋白質的染色提高 40 倍。

12. 染色使用的玻璃器皿必須非常干凈，用酸浸泡可以滿足要求。

13. 銀染應盡快照相，隨著時間延長，蛋白條帶會變淺，而背景會加深。

14. 銀染容器zui理xiang的是玻璃平皿，其次是搪瓷盤和密胺塑料盤等。

15. 試劑如有沉淀析出，混勻溶解（可加熱）后室溫使用。

PAGE凝膠銀染試劑盒 凝膠染色

產品訂購信息：

NobleRyder  G5098  PAGE凝膠銀染試劑盒,蛋白銀染試劑盒 蛋白快速銀染試劑盒,PAGE Gel Silver Staining Kit 1L