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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 100T/48S |
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貨號 | BC8953 | 應用領域 | 環保,化工,生物產業,農林牧漁,制藥/生物制藥 |
主要用途 | 一種廣泛存在于生物體內的金屬酶,是重要的氧自由基清除劑 |
NobleRyder BC8953超氧化物歧化酶(SOD)活性檢測試劑盒 Superoxide Dismutase(SOD) Activity Assay Kit
產品貨號:BC8953
產品名稱:超氧化物歧化酶(SOD)活性檢測試劑盒 Superoxide Dismutase(SOD) Activity Assay Kit
產品規格:100T/48S
超氧化物歧化酶(SOD)活性檢測試劑盒 抗逆
產品簡介:
中文名稱:超氧化物歧化酶(SOD)活性檢測試劑盒
英文名稱:Superoxide Dismutase(SOD) Activity Assay Kit
規格:100T/48S
檢測方法:微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
儲存條件:Store at 2-8℃,6 months
具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準
NobleRyder BC8953超氧化物歧化酶(SOD)活性檢測試劑盒 Superoxide Dismutase(SOD) Activity Assay Kit
SOD(EC 1.15.1.1)是一種廣泛存在于生物體內的金屬酶,是重要的氧自由基清除劑,能催化超氧化物陰離子發生歧化作用,生成H2O2和O2。SOD不僅是超氧化物陰離子清除酶,也是H2O2主要生成酶,在生物抗氧化系統中具有重要作用。
通過黃piao呤及黃piao呤氧化酶反應系統產生超氧陰離子(O2-),O2-可還原氮藍四唑生成藍色甲臜,后者在560nm處有吸收;SOD可清除O2-,從而抑制了甲臜的形成;反應液藍色越深,說明SOD活性愈低,反之活性越高。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器/細胞超聲破碎儀、冰和蒸餾水。
操作步驟:
一、樣本處理(可適當調整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)
1.細胞、細菌樣本:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清,按照每500萬細菌或細胞加入1mL提取液,超聲波破碎(功率200w,超聲3s,間隔10s,重復30次)。8000g4C離心10分鐘,取上清,置冰上待測。
2.組織樣本:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5-10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿:8000g4℃離心10min,取上靖,置冰上待測。
3.血清(漿)樣本:直接檢測。
二、測定步驟
1.分光光度計/酶標儀預熱30min以上,調節波長至560nm,分光光度計蒸餾水調零。
2.臨用前根據樣本數量取部分試劑一、試劑三和試劑四工作液37℃水浴5min 以上。
三、SOD活性計算
1、抑制百分率的計算
抑制百分率=(ΔA空白-△A測定)÷△A空白x100%
盡量使樣本的抑制百分率在30-70%范圍內,越靠近50%越準確。如果計算出來的抑制百分率小于30%或大于70%,則通常需要調整加樣量后重新測定。如果測定出來的抑制百分率偏高,則需適當稀釋樣本;如果測定出來的抑制百分率偏低,則需重新準備濃度比較高的待測樣本或者提高操作表中樣本體積,同時減少相同的蒸餾水體積。
2、SOD酶活性單位:在1mL體系中,上述黃piao呤氧化酶偶聯反應體系中抑制百分率為50%時,反應體系中的 SOD酶活性定義為一個酶活性單位。
3、SOD酶活性計算:
(1)血清(漿)SOD活性(U/mL)=[抑制百分率+(1-抑制百分率)xV 反總]+1mL÷V 樣xF
=10x抑制百分率÷(1-抑制百分率)xF
(2)組織、細菌或培養細胞SOD活性計算:
a.按樣本蛋白濃度計算
SOD活性(U/mg prot)=[抑制百分率÷(1-抑制百分率)xV 反總]+1mL +(V 樣xCpr)xF
=10x抑制百分率+(1-抑制百分率)÷CprxF
b.按樣本質量計算
SOD活性(U/g質量)=[抑制百分率+(1-抑制百分率)xV 反總]+1mL +(WxV 樣+V 樣總)xF
=10x抑制百分率+(1-抑制百分率)÷WxF
c.按細菌或細胞數量計算
SOD活性(U/104cell)=[抑制百分率+(1-抑制百分率)xV 反總]+1mL+(NxV 樣+V 樣總)xF
=10x抑制百分率+(1-抑制百分率)xF÷N
V反總:反應總體積,0.2mL;V樣:加入反應體系中的樣本體積,0.02mL;V樣總:加入提取液體積1mL:
Cpr:蛋白樣本濃度,mg/mL:W:樣本質量,g;N:細胞或細菌總數,以萬計;F:樣本稀釋倍數:1mL:1mL反應體系。
注意事項:
1、樣本和試劑二工作液使用時在冰上放置。
2、樣本較多時,可按表格配制測定管工作液和對照管工作液(包含試劑一、(試劑二工作液)、試劑三、蒸餾水),試劑四工作液必須最后加入。
3、反應完成后,可能有沉淀生成,混勻后測定即可。
超氧化物歧化酶(SOD)活性檢測試劑盒 抗逆
產品訂購信息:
BC8953超氧化物歧化酶(SOD)活性檢測試劑盒 Superoxide Dismutase(SOD) Activity Assay Kit 100T/48S
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