NobleRyder BC2563  過氧化氫酶（CAT）活性檢測試劑盒（鉬酸銨法) Catalase (CAT) Activity Assay Kit （Ammonium Molybdate-Chromogenic Method）

產品貨號：BC2563

產品名稱：過氧化氫酶（CAT）活性檢測試劑盒（鉬酸銨法) Catalase (CAT) Activity Assay Kit （Ammonium Molybdate-Chromogenic Method）

產品規格：100T/48S

過氧化氫酶CAT活性檢測試劑盒鉬酸銨法 抗逆

產品簡介：

中文名稱：過氧化氫酶（CAT）活性檢測試劑盒（鉬酸銨法）

英文名稱：Catalase (CAT) Activity Assay Kit （Ammonium Molybdate-Chromogenic Method）

規格：100T/48S

檢測方法：微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader

儲存條件：Store at 2-8℃，6 months

具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準

NobleRyder BC2563過氧化氫酶（CAT）活性檢測試劑盒（鉬酸銨法) Catalase (CAT) Activity Assay Kit （Ammonium Molybdate-Chromogenic Method）

產品說明：

CAT(EC 1.11.1.6)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，是最主要的H2O2清除酶，在活性氧清除系統中具有重要作用。

H2O2可與鉬酸銨反應形成穩定的黃色復合物，在405nm處有強烈吸收峰，且其吸光值大小與過氧化氫濃度成正比。通過測定反應體系中剩余的H2O2量，得出被CAT催化分解的H2O2量，進而反映CAT的活性。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、恒溫水浴鍋、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器/細胞超聲破碎儀、冰和蒸餾水。

操作步驟：

一、樣本處理(可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻)

1、細菌、細胞或組織樣本的制備：

a、細菌或培養細胞：收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清：按照每500萬細菌或細胞加入1mL提取液，超聲波破碎細菌或細胞(功率200W，超聲3s，間隔9s，重復30次)：8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

b、組織：按照組織質量(g)：提取液體積(V)=1：5~10(建議稱取約0.1g組織，加入ImL提取液)進行冰浴勻漿。8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、血清(漿)樣本：直接檢測。

二、測定步驟

1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上，調節波長至405nm，蒸餾水調專。

2、測定前將30μmol/mL標準品與試劑一在25°C水浴10min 以上。

三、CAT 活性計算

1、血清(漿)CAT活力的計算：

單位的定義：在25℃條件下，每mL血清(漿)每分鐘催化1μmolH2O2降解定義為一個酶活力單位。

CAT(U/mL)= (ΔA+△A標準)x30xV標準+V 樣+TxF=15x(△A+△A標準)xF

2、組織、細菌或細胞中CAT 活力計算：

1)按樣本蛋白濃度計算：

單位的定義：在25℃條件下，每mg組織蛋白每分鐘催化1μmol H₂O₂降解定義為一個酶活力單位。

CAT(U/mg prot)=(△A+ΔA標準)x30xV標準+(CprxV樣) +TxF=15x(△A÷AA 標準)+CprxF

2)按樣本質量計算：

單位的定義：在25C條件下，每g組織每分鐘催化1μmol H₂O₂降解定義為一個酶活力單位。

CAT(U/g 質量)≡(△A+△A標準)x30xV標準+(V樣÷V 樣總xW) +TxF=15x(△A+△A標準)+WxF

3)按細菌或細胞數量計算：

單位的定義：在25℃條件下，每1萬個細菌或細胞每分鐘催化1μmolH₂O₂降解定義為一個酶活力單位。

CAT(U/10'cell)= (△A÷△A標準)x30xV標準+(V樣+V樣總x500)+TxF=0.03x(ΔA÷△A標準) xF

30：標準品濃度，30μmol/mL;V標準：加入標準品體積，0.1mL;V樣：加入樣本體積，0.02mL;T：反應時間，10min;F：樣本稀釋倍數：Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL;V樣總：加入提取液體積，1mL;W：樣本質量，g;500：細胞或細菌總數，500萬。

注意事項：

1.本試劑盒多給出25mL的提取液，供樣本稀釋使用。

2.如果反應液有大量氣泡產生，將樣本用提取液稀釋后再進行測定。

3.如果樣本量過多，為保證反應時間(25℃，10min)的準確性，建議分成若干批次檢測，每批次檢測均需配1-2個空白管與標準管。

4.當A測定小于0.12或者約等于A對照時，建議將樣本用提取液稀釋后再進行測定。

5.動物組織如肝臟、腎臟等酶活性較高樣本，預實驗建議將樣本用提取液多個高倍稀釋(如25倍、50倍、100倍、200倍等)試驗后，再進行檢測。

過氧化氫酶CAT活性檢測試劑盒鉬酸銨法 抗逆 

產品訂購信息：

BC2563過氧化氫酶（CAT）活性檢測試劑盒（鉬酸銨法) Catalase (CAT) Activity Assay Kit （Ammonium Molybdate-Chromogenic Method） 100T/48S