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抗壞血酸氧化酶活性測定試劑盒-常備現貨

參  考  價面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號BW6006

品       牌NobleRyder/諾博萊德

廠商性質經銷商

所  在  地北京市

更新時間:2025-07-18 09:05:08瀏覽次數:93次

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供貨周期 現貨 規格 100T/96S
貨號 BW6006 應用領域 環保,化工,生物產業,農林牧漁,制藥/生物制藥
主要用途 該過程中電子的跨膜運輸能夠促進細胞生長。
AAO 是定位于植物細胞壁的糖蛋白,屬“藍銅氧化酶"家族。細胞壁內的抗壞血酸和AAO 與細胞壁的代謝和生長有著密切的聯系。
抗壞血酸氧化酶活性測定試劑盒-常備現貨


抗壞血酸氧化酶(ascorbate oxidaseAAO活性測定試劑盒說明書

微量法 100T/96S

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義:

AAO 是定位于植物細胞壁的糖蛋白,屬“藍銅氧化酶"家族。細胞壁內的抗壞血酸和AAO 與細胞壁的代謝和生長有著密切的聯系。AAO 氧化 AsA 所形成的 MDHA 可通過質膜上的細胞色素b 還原,該過程中電子的跨膜運輸能夠促進細胞生長。

測定原理:

AAO 可直接氧化AsA,通過測定AsA 的氧化量,可計算得 AAO 活力。

抗壞血酸氧化酶活性測定試劑盒-常備現貨

組成:

產品名稱

BW6006-100T/96S

Storage

試劑一:液體

100ml

4℃

試劑二:液體

20ml

4℃

試劑三:粉劑

1

4℃

說明書

一份

 

試劑三:粉劑×1 瓶,4℃保存。臨用前加入 2ml 蒸餾水充分溶解。

自備儀器和用品:

低溫離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板(UV 板)、可調式移液器、研缽、冰、蒸餾水。


具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準


粗酶液提取:

按照組織質量(g):試劑一體積(ml) 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1ml 試劑一)進行冰浴勻漿。16000g,4℃離心 10min,取上清置冰上待測。

AAO 測定操作:

1. 分光光度計/酶標儀預熱 30 min,調節波長到 265 nm

2. 試劑二在 25℃水浴鍋中預熱 30 min

3. 依次在微量石英比色皿/96 孔板中加入 20μl 上清液、170μl 預熱的試劑二和 10μl 試劑三,迅速混勻后在265nm 測定 10s  130s 光吸收A1 A2,△A =A1-A2

AAO 活性計算公式:

a. 使用微量石英比色皿測定的計算公式如下

(1). 按蛋白濃度計算

AAO 活性單位定義:25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化 1nmol AsA  1 個酶活單位。

AAO(nmol/min /mg prot) = △A÷(ε×d)×V 反總×109÷(Cpr×V )÷T

= 92.4×△A÷Cpr

(2). 按樣本質量計算

AAO 活性單位定義:25℃中每克樣本每分鐘氧化 1nmol AsA  1 個酶活單位。

AAO(nmol/min/g 鮮重) = △A÷(ε×d)×V 反總×109÷(W×V 樣÷V 樣總)÷T

= 92.4×△A÷W

ε:AsA  265nm 處摩爾吸光系數為 5.42×104 L/mol/cm;d:比色皿光徑(cm),1 cm V 反總:反應體系總體積(L),200μl=2×10-4 L;106:1mol=1×106μmol;Cpr:上清液蛋白質濃度(mg/ml),需要另外測定,建議使用本公司 BCA 蛋白質含量測定試劑盒;W :樣品質量;V 樣:加入反應體系中上清液體積

(ml),20μl=0.02 ml;V 樣總:提取液體積,1ml T:催化反應時間(min),2min。

b. 使用 96 孔板測定的計算公式如下

(1). 按蛋白濃度計算

AAO 活性單位定義:25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化 1nmol AsA  1 個酶活單位。

AAO(nmol/min /mg prot) = △A÷(ε×d)×V 反總×109÷(Cpr×V )÷T

=184.8×△A÷Cpr

(2). 按樣本質量計算

AAO 活性單位定義:25℃中每克樣本每分鐘氧化 1nmol AsA  1 個酶活單位。

AAO(nmol/min/g 鮮重) = △A÷(ε×d)×V 反總×109÷(W×V 樣÷V 樣總)÷T

= 184.8×△A÷W

ε:AsA  265nm 處摩爾吸光系數為 5.42×104 L/mol/cm;d:96 孔板光徑(cm),0.5 cm V 反總:反應體系總體積(L),200μl=2×10-4 L;106:1mol=1×106μmol;Cpr:上清液蛋白質濃度(mg/ml),需要另外測定,建議使用本公司 BCA 蛋白質含量測定試劑盒;W :樣品質量;V 樣:加入反應體系中上清液體積(ml),20μl=0.02 ml;V 樣總:提取液體積,1 ml;

T:催化反應時間(min),2min

注意事項:

配制好的試劑放在 4℃保存,三天內使用完。

抗壞血酸氧化酶活性測定試劑盒-常備現貨


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