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單克隆抗體被認為是具有高度特異性的靶向藥物，其對腫
瘤細胞的靶向性非常高。而抗體 - 藥物偶聯物（Antibody-drug
conjugates，以下簡稱 ADCs）技術，就是在抗體蛋白的特定
氨基酸上偶聯具有抗腫瘤作用的應化療藥物（或稱小分子
藥物），以增加單克隆抗體的療效、并降低小分子藥物的毒
性。相比單克隆抗體，ADCs 藥物的生產工藝更為復雜，因此
為了保證 ADCs 藥物的安全性和有效性，需對 ADCs 藥物的質
量進行監控。藥物抗體比（drug to antibody ratio，以下簡稱
DAR）是評價 ADCs 藥物的生產工藝和產品質量的一個重要參
數。目前大部分上市和在研 ADCs 藥物主要包括基于抗體自身
的賴氨酸進行偶聯的 ADCs 藥物（lysine-linked ADCs）和基于
抗體自身鏈間二硫鍵經還原后的半胱氨酸進行偶聯的 ADCs 藥
物（cysteine -linked ADCs）（圖 1）。兩類 ADCs 的 DAR 測
定通常有UV、HIC和MS三種方法，其中MS檢測方法因其快速、
靈敏度高和強大的定性功能等優點，愈來愈廣泛地被用于測
定 ADCs 的 DAR。目前 MS 用于測定 ADCs 的 DAR 通常是基
于傳統的 RPLC/MS 平臺，該平臺下 RPLC 采用的流動相呈酸
性，且含有較高濃度的乙腈，蛋白在此條件下大多發生變性，
因此測定結果嚴格意義上講反映的是 ADCs 變性后的 DAR。
對于 lysine-linked ADCs 而言，上述變性條件不影響其抗體結
構的完整性，故 RPLC/MS 平臺不影響其 DAR 測定。然而，
對于 cysteine-linked ADCs 而言，上述變性條件破壞了維持抗
體空間結構的非共價作用，ADCs 部分解離其輕鏈或重鏈，故
RPLC/MS平臺無法用于其DAR測定。隨著非變性質譜（Native
MS）技術的不斷發展和推廣，采用非變性質譜進行 cysteine-
linked ADCs 分析顯示了強大的應用潛力。

所需儀器：Exactive Plus EMR 質譜儀

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